李天丽 ，周亚维 ，汤朝起 ，瞿永生 ，李朋富*

1.南京大学生命科学院，南京市汉口路22号 210093

2.上海烟草集团有限责任公司，上海市杨浦区长阳路717号 200082

烤烟是我国种植面积最大，也是最主要的烟草类型［1］。烤烟收获、调制后要经过发酵或醇化才能应用于卷烟生产。未经过醇化处理的烟叶，由于其在燃烧过程中会产生令人不愉快的气味而不宜使用。有研究表明，烟叶醇化过程中，烟碱、蛋白质、氨基酸、高级脂肪酸等物质会发生分解和转化，形成具有香气的小分子化合物，进而明显改善烟叶的香气和吸味品质［2］。烟叶表面的许多微生物，在发酵过程中发挥了重要作用［1］。Reid等［3］发现，在发酵烟叶上存在的大量细菌，主要是芽孢杆菌属（Bacillus）。16S rDNA序列分析显示，在醇化烟叶表面鉴定出多达42种细菌，其中以芽孢杆菌属、假单胞菌属（Pseudomonas）和噬菌弧菌属（Bacteriovorax）为主［1，4］。然而，对于烟叶醇化过程中微生物活性的研究报道较少。

烟碱是存在于烟草中的主要生物碱，对人体健康具有危害性［5］。因此，降低烟草制品和烟草废弃物中的烟碱已成为一个必需解决的问题。利用微生物来降解烟碱受到人们越来越多的关注。从烟叶表面和种植烟草的土壤中，人们已分离到了很多可以降解和利用烟碱的细菌，包括假单胞菌（Pseudomonas sp.）［6-7］、节杆菌（Arthrobacter sp.）［8-9］、 肠 杆 菌（Enterobacter cloacae）［10］、无 色 杆 菌（Achromobacter nicotinophagum）［11］、 纤 维 菌（Cellulomonas sp.）［12］、争论产碱菌（Alcaligenes paradoxus）［13］、中间苍白杆菌（Ochrobactrum intermedium）［14］、芽孢杆菌（Bacillus simplex）［15］、红 球菌（Rhodococcus sp.）［16］、剑 菌（Ensifer sp.strain N7）［17］、土壤杆菌（Agrobacterium sp.）［18］、申氏杆菌（Shinella sp.）［19］、不动杆菌（Acinetobacter sp.）和鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas sp.）［20］。然而，关于醇化过程中烟叶表面微生物对于烟碱降解能力的报道却不多见，因此，从醇化烟叶表面分离和鉴定了具有降解烟碱活性的菌群和单菌，并分析了其降解特性。……