邓 姝 沈建平 沈一平 林圣云 胡致平 郑智茵 周郁鸿

(浙江省中医药大学附属第一医院血液科，浙江省杭州市邮电路54号，310006)

多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)是一种浆细胞恶性肿瘤。目前，对于晚期、复发和耐药MM患者的治疗仍然是一个难题。已有研究表明三氧化二砷(As2O3)在体外能够抑制骨髓瘤细胞的增殖并诱导凋亡［1］本实验通过研究 As2O3联合维生素 K3对 RPMI8226细胞增殖与凋亡的影响，期望为临床合理应用As2O3，治疗MM提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226由本科室长期保存，实验从－80℃冰箱取出，快速复苏后传代培养备用。培养基为RPMI－1640培养液，于37℃，5%CO2培养箱培养，取对数生长期细胞用于实验。

1.2 主要试剂及仪器 RPMI1640培养液:Sigma公司产品。小牛血清:杭州四季青生物工程材料研究所产品。四甲基噻唑氮蓝(MTT，华美生物工程公司)，二甲亚砜(Sigma公司);Annexin－V－FITC凋亡检测试剂盒(深圳晶美公司)。As2O3注射液(黑龙江伊达药业公司)，维生素K3(无锡第七制药厂)，两药使用前均用不含血清的RPMI－1640稀释至所需浓度。FACS Calibur型流式细胞仪(美国Becton Dickinson公司)。

1.3 研究方法

1.3.1 实验分组 根据所加药物不同分为4组，依次为空白对照组、维生素K3组、As2O3组、维生素K3+As2O3组。细胞培养取对数生长期细胞，以RPMI－1640培养液调整细胞浓度至2×105/mL。在24孔培养板中分别加入2mL细胞悬液。空白对照组加入培养液。维生素 K3组加入维生素 K3，浓度分别为2μmol/L，5μmol/L，10μmol/L。As2O3组加入 As2O3，使其终浓度为2μmol/L。维生素K3+As2O3组同时加入维生素K3和As2O3，各孔细胞悬液中As2O3的终浓度均为5μmol/L，维生素K3的终浓度分别为2μmol/L、5μmol/L、10μmol/L(根据参考文献及多次预实验确定)。加药后 12h、24h、48h、72h 收集细胞。……