周洪伟 郝丽静 杨 勇 张 林 杨 桃 周 坤 吴晓丹

(1北京中医药大学中药学院，100102;2河北大学中医学院;3北京中医药大学基础医学院)

玄参为玄参科植物玄参Scrophularia ningpoensis Hemsl.的干燥根，其味甘、苦、咸，性微寒，功效清热凉血、滋阴降火、解毒散结。现代研究表明，玄参主要含环烯醚萜类、苯丙素苷类，尚含植物甾醇、有机酸类、黄酮类、三萜皂苷、挥发油、糖类、生物碱及微量的单萜和二萜成分等，其中哈巴俄苷在玄参中含量较高，是玄参的特征性有效成分［1～2］;哈巴苷与哈巴俄苷可调节免疫功能，保护血管内皮细胞，具有较广泛的药理活性［3－4］。本研究采用星点设计 － 效应面法(CCDRSM)研究玄参中哈巴苷与哈巴俄苷的提取工艺，优选的工艺简便可行，为该方法在中药提取工艺优化中的应用提供实验依据。

1 仪器与试药

HPLC系统:LC－10ATVP四元泵，DGU－14A脱气机，CTO－10TVP柱温箱，SPD －M10TVP检测器，SIL－10ADVP自动进样器，CLASS－VP色谱工作站(岛津公司);AUW120D电子分析天平(岛津)。

哈巴苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号:111729－200603);哈巴俄苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号:111730－201106);玄参药材(购自保定北京同仁堂药店有限责任公司);甲醇、乙腈(色谱纯);纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司)。

2 方法与结果

2.1 哈巴苷与哈巴俄苷的HPLC测定

2.1.1 色谱条件 Agilent eclipse XDB－C18柱(4.6mm ×250mm，5μm);乙腈为流动相 A，水为流动相B，按表1进行梯度洗脱;流速1mL·min－1;柱温30℃;检测波长哈巴苷210nm，哈巴俄苷278nm。

表1 流动相梯度洗脱方案

2.1.2 对照品溶液的制备 分别精密称取经五氧化二磷减压干燥36h的哈巴苷与哈巴俄苷对照品18.48mg、18.14mg，分别置10mL量瓶中，加甲醇定容，即得哈巴苷与哈巴俄苷对照品储备液。……