HPLC法测定红豆杉细胞培养物中的α-萘乙酸
2012-09-11黄巧明骆雪兰徐国熙李干雄刘志伟
天然产物研究与开发 2012年1期
黄巧明,骆雪兰,徐国熙,李干雄,刘志伟
广东科伦药业有限公司研发部,广东梅州 514031
萘乙酸是一种生长素类性质的生长调节剂,其毒性小,且具有明显的增产效果,因此在农业上得到广泛应用,但日本、美国对其在农产品的残留均有严格的限量。紫杉醇是从红豆杉植物中提取的一种抗癌药,由于红豆杉植物资源短缺,梅兴国等采用红豆杉植物细胞培养技术生产紫杉醇[1],在其生产过程中添加萘乙酸对生物量具有明显的促进效果,而且在鲜细胞和培养液中的紫杉醇产量均有所增加,因此萘乙酸在红豆杉细胞培养中也作为一种调节剂。
目前,国内对萘乙酸在水稻、水果和蔬菜中的残留检测已有报道,检测方法主要有分光光度法、气相色谱法和高效液相色谱法等。本文采用了溶剂萃取前处理,高效液相色谱分离测定,分析了红豆杉细胞培养物中的萘乙酸残留状况,结果准确可靠、灵敏度高,能符合农药残留的分析要求。
1 材料与方法
1.1 仪器和试药
Waters 515高效液相色谱仪、Waters 2487紫外检测器(美国Waters公司),UV-2401 PC紫外分光光度计(日本岛津公司),旋转蒸发仪。
对照品:萘乙酸纯度为99%(国药集团化学试剂有限公司);乙腈为色谱级试剂;水为超纯水;二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、磷酸和磷酸二氢钾为分析纯试剂,红豆杉细胞培养液和鲜细胞由本单位提供。
1.2 样品的处理和制备
培养液样品:将鲜细胞用200目滤布过滤,滤液即为红豆杉细胞培养液。精密量取50 mL培养液,加入50 mL二氯甲烷萃取,共萃取三次,收集二氯甲烷溶液经旋转蒸发仪减压浓缩至干,用乙醇溶解洗脱并定容5 mL,摇匀待分析。……
登录APP查看全文
