杨绍兴 汤传昊 王思涵 宋三泰 刘晓晴

肺癌是发病率和病死率均居第一位的肿瘤，其中非小细胞肺癌占80%，按其病理分型依次递减为腺癌、鳞癌、大细胞肺癌等。腺癌易发生血行转移，近年的研究[1]又发现其所占比例有所增长，成为女性和年轻患者中最为常见的一种类型，对肺腺癌细胞的生物学特性进行深入的研究有着非常重要的意义。CD147，又称基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN），是一类位于肿瘤细胞膜表面的跨膜糖蛋白，属于免疫球蛋白超家族，能够刺激成纤维细胞产生大量基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases, MMPs）[2]，可介导基底膜组成成分和细胞外基质大分子的重塑，促进肿瘤的浸润和转移，诱导肿瘤血管的生成[3]。尽管CD147的功能和作用在其它类型肿瘤研究中已有报道，但在肺腺癌细胞生物学特性中还未见研究报道。本实验拟通过构建CD147的慢病毒表达载体，建立稳定表达CD147的人肺腺癌A549细胞系，检测上调表达CD147后MMP-9及人肺腺癌细胞增殖、侵袭能力的变化情况，为研究CD147在人肺腺癌生物学特性中的功能和作用奠定基础。

1 材料和方法

1.1 材料 过表达慢病毒载体pEGFP购自Addgene公司，慢病毒包装质粒pLP1、pLP2、pLP/VSVG购自Invitrogen公司。pMD-T载体购自TaKaRa公司。SYBR Green real-time PCR mixture购自Qiagen公司。限制性内切酶、dNTP、Taq酶以及快速连接试剂盒均购自TaKaRa公司，引物合成及测序由上海英骏公司完成。CCK-8试剂盒购自DojinDo公司。转染试剂Lipofectamine 2000购自Invitrogen公司。慢病毒包装细胞293FT细胞购自Invitrogen公司。人肺腺癌细胞系A549由清华大学生命科学院肿瘤分子研究室惠赠。

1.2 方法

1.2.1 引物设计 根据PubMed上CD147基……