程明国 沈若武 王守彪 夏玉军

1.青岛大学医学院人体解剖学教研室，山东青岛 266041；2.青岛市第三人民医院骨外科，山东青岛 266041

骨髓炎是一组细菌感染骨髓、骨皮质和骨膜而引起的炎性疾病。机体免疫状态对骨髓炎的发生发展影响很大，一些研究证实骨髓炎时出现T和B淋巴细胞功能的障碍[1-2]，而关于其免疫调节状态还有许多不明之处。近年来研究发现，机体内存在着一群新型的不同于已知的Th17、Th1、Th2和Treg的CD4+Th细胞亚群，具有分泌IL-9和IL-10的能力，称之为Th9细胞[3-4]。目前，尚未见Th9细胞与骨髓炎有关的报道。本文旨在通过研究骨髓炎患者局部组织中Th9细胞效应因子IL-9、IL-10的含量，探讨Th9细胞在骨髓炎发病中的作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组

大耳白兔20只，体重2.2～2.5 kg，雌雄不限，购于山东鲁抗医药公司动物中心（许可证号scxk鲁20080011）。将动物随机分为手术组（n=10），假手术组（n=5）和对照组（n=5）。

1.2 主要试剂

IL-9和IL-10单克隆抗体（兔抗鼠），即用型SABC试剂盒等，购于武汉博士德生物工程有限公司。

1.3 建立兔胫骨近端骨髓炎模型

10%水合氯醛（500 mg/kg）腹腔注射麻醉，取仰卧位，无菌条件下取右胫骨髌内下纵切口，长约4 cm。切开皮肤、皮下，显露胫骨近端内侧，用3 mm钻头的手钻，在该处钻3个纵向相连、部分重叠的骨洞。用小刮匙刮除松质骨，修整骨洞边缘，制成一1.0 cm×0.5 cm的矩形骨窗。于骨窗内注入5×106CFU/mL金葡球菌0.5 mL及鱼肝油酸钠50 g/L 0.5 mL，10 min后用骨蜡将骨窗封闭，反复冲洗后缝合伤口[5]，术后回笼常规喂养2周后处死。假手术组仅显露胫骨，然后关闭切口。正常对照组不做任何处理。……