张光明，郎 朗，李 钰，马 军

(1.哈尔滨工业大学 市政环境工程学院，150090哈尔滨;2.中国人民大学 环境学院，100872北京;3.哈尔滨商业大学生命与环境科学研究中心，150028哈尔滨;4.哈尔滨工业大学理学院，150001哈尔滨)

内分泌干扰物(EDCs)可致人体内分泌失调，引发多种疾病，还会对后代带来不良影响.双酚A是典型的雌激素类EDCs，可严重干扰内分泌系统，威胁着胎儿和儿童的健康.欧盟认为双酚A会诱发性早熟，从2011年3月2日起，禁止生产含双酚A的婴儿奶瓶.在我国北京、上海、深圳、杭州等大中城市饮用水水源中均发现了一定浓度的双酚A［1］，其雌激素活性的有效控制引起广泛关注.雌二醇(E2)是人体天然雌激素的代表物质.前期研究发现E2与双酚A共存时可以弱化双酚A的雌激素活性［2］.这一现象对于控制双酚A对人体尤其是女性的毒害作用具有重要意义.本文将深入研究这一现象发生的可能机制.

1 实验

所用乳腺癌MCF-7细胞为实验室自行培养.双酚A、E2、苯甲基磺酰氟(PMSF)、抑肽酶A、亮抑肽酶、色胺酸等购自美国Sigma公司.丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、四甲基乙二胺(TEMED)购自美国Ameresco公司.其他材料为国产分析纯试剂.实验中双酚A、E2浓度分别为10-8、10-12mol/L.所用主要设备包括GeneAmp®PCR System 9700(Applied Biosystems公司)、DYY-6B电泳仪(北京市六一仪器厂)、蛋白质电泳及Western杂交转膜系统(Bio-Rad)、LSM Meta510激光共聚焦仪(Zeiss公司)、IGO 150二氧化碳培养箱(Thermo公司).

采用流式细胞仪法测定细胞周期的变化［3］.细胞增殖指数ⅠP=(nS+nG2)/(nG1+nS+nG2)×100%，nS为DNA合成期细胞数;nG1为第1间隙期细胞数;nG2为第2间隙期细胞数.

采用WESTERN BLOT法测定乳腺癌MCF-7细胞内雌激素受……