马 晶,丁诚实,余 鸿

(1.枣庄职业学院医学系,山东枣庄 277800;2.枣庄学院生命科学学院,山东 枣庄 277160;3.泸州医学院 组胚教研室,四川 泸州 646000)

当归是国药精华,其味甘而重,专能补血;其气轻而辛,又能行血。由于其作用广泛、副作用小,使其在妇产科临床上具有独特的优势。研究表明当归可以减弱低氧时神经元的变性[1],但其如何对抗神经系统的损伤机制还有待研究。近年来研究发现,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)具有类似血管源性的神经保护和神经营养作用,但VEGF是否也参与宫内低氧新生大鼠的神经系统的改变目前尚不确定。本实验在前期的研究基础[2]上进一步延长低氧时间(低氧5 d),观察神经元及神经胶质细胞的变化,研究当归对其是否有干预作用并探讨其可能的机制。

1 材料与方法

1.1 材料

SD雌、雄大鼠各15只(220～260 g)由泸州医学院动物实验中心提供(一级合格动物,许可证号:川实动管质第17号);大鼠神经特异性烯醇化酶(neurone specific enolase,NSE)mR NA、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)mR NA、VEGF mRNA原位杂交检测试剂盒,3,3'-二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒购自武汉博士德生物工程公司;原位杂交用焦碳酸二乙酯(DEPC)由第四军医大学试剂公司提供;250 g/L的当归注射液(购自武汉大学中南医院,生产批号:070823)。三气培养箱购自美国REVCO COMPANY;切片机为德国莱卡产品;OLYMPUS Ax-70显微成像系统购自日本OLYMPUS光学仪器有限公司;Image-Pro Plus 6.0图像分析系统为Media Cybernetics公司产品。

1.2 动物及分组

雌大鼠分别与雄大鼠合笼配种,次日晨见阴栓记为大鼠怀孕0 d,孕鼠随机均分为对照组、低氧组和当归组。

1.3 宫内低氧动物模型制备

参照本实验小组前期制作的宫内低氧模型[3],但延长低氧时间。……