张 盼， 宋国华， 乔 奇， 秦艳红，张德胜， 田雨婷， 郑文明， 张振臣＊

（1.河南农业大学生命科学学院，郑州 450002；2.河南省农业科学院植物保护研究所，郑州 450002；3.河南省许昌市农产品质量安全检测检验中心，许昌 461000）

烟粉虱中甘薯褪绿矮化病毒（SPCSV）的快速检测技术

张 盼1，2， 宋国华3， 乔 奇2， 秦艳红2，张德胜2， 田雨婷2， 郑文明1， 张振臣2＊

（1.河南农业大学生命科学学院，郑州 450002；2.河南省农业科学院植物保护研究所，郑州 450002；3.河南省许昌市农产品质量安全检测检验中心，许昌 461000）

建立了利用NCM－ELISA、RT－PCR和半巢式RT－PCR检测烟粉虱中SPCSV的方法，比较了3种检测方法的灵敏性。结果表明，NCM－ELISA最低能从16头带毒烟粉虱中检测出SPCSV；RT－PCR能稳定地从3头以上带毒烟粉虱中检测出SPCSV；半巢式RT－PCR能稳定地从单头烟粉虱中检测出SPCSV。检测灵敏性研究表明，用体外转录的RNA作为核酸模板，RT－PCR可检测的最低浓度为5.69×104拷贝／μL，半巢式RT－PCR为5.69×101拷贝／μL，说明半巢式RT－PCR检测方法的灵敏性比RT－PCR高1 000倍。

甘薯褪绿矮化病毒； 烟粉虱； 硝酸纤维素膜酶联免疫吸附测定； 半巢式RT－PCR

甘薯褪绿矮化病毒（Sweetpotatochloroticstunt virus，SPCSV）属于长线形病毒科（Closteroviridae）毛形病毒属（Crinivirus）成员。该病毒的基因组为双组分单链正义RNA，基因组大小为17.6kb左右［1］。根据血清学关系和核苷酸序列，SPCSV可划分为东非（EA）和西非（WA）两个株系［2］。20世纪70年代首先在非洲发现了SPCSV，目前主要分布在非洲和南美的一些国家［3］。SPCSV是危害甘薯的主要病毒之一，特别重要的是，SPCSV可与马铃薯Y病毒属（Potyvirus）的甘薯羽状斑驳病毒（Sweetpotatofeatherymottle virus，SPFMV）协生共侵染甘薯引起甘薯病毒病害SPVD（sweet potato virus disease，SPVD）。SPVD 是甘薯上最严重的病毒病害之一，通常可使甘薯减产50%～98%，甚至绝收［3－4］。……