张 玮， 燕继晔， 郭 霞， 李兴红

（北京市农林科学院植物保护环境保护研究所，北京 100097）

葡萄溃疡病菌原生质体的制备与再生条件的优化

张 玮， 燕继晔， 郭 霞， 李兴红＊

（北京市农林科学院植物保护环境保护研究所，北京 100097）

对葡萄溃疡病菌菌丝摇培时间、酶解时间、渗透压稳定剂种类及再生培养基类型进行了探索和优化，建立了葡萄溃疡病菌稳定、高效的原生质体制备体系。以SR培养基作为再生培养基时，原生质体再生率达到最高，为32.2%。该研究为建立葡萄溃疡病菌高效、稳定的遗传转化体系，开展其致病机理的研究奠定了基础。｀

葡萄溃疡病菌； 原生质体； 制备与再生条件

葡萄座腔菌科真菌葡萄溃疡病菌（Botryosphaeriaspp.）可侵染葡萄果实、枝干等部位，其所引起的葡萄溃疡病可造成葡萄果梗干枯、果实干缩或掉粒、枝干溃疡、树势减弱等症状，严重时会导致植株整株死亡。截至目前，已发现葡萄座腔菌科的15种真菌能引起葡萄溃疡病，在美国、墨西哥、法国、意大利、南非、智利等14个国家的葡萄产区均已发生，并造成了不同程度的损失。2009年，李兴红等在我国浙江省首次发现并报道了由病原菌Botryosphaeria dothidea引起的葡萄溃疡病［1］，同年，燕继晔和李兴红在湖南、湖北和浙江田间发现并鉴定了引起该病害的另一新种B.rhodina［2］。随后，李兴红课题组又于2010年在山东省和河北省等地分离了葡萄溃疡病的另一种病原菌B.obtusa［3］。目前，该病害严重影响了葡萄的食用价值和经济效益，成为阻碍葡萄产业健康、良性发展的重要威胁之一。……