苦参碱对豚鼠心室肌细胞动作电位及钠通道的影响
2012-08-21李妙龄唐汉庆庞宇舟李国彰
李妙龄,唐汉庆,王 勇,郭 健,庞宇舟,李国彰△
(1.泸州医学院,四川 泸州 646000;2.北京中医药大学,北京 100029;3.广西中医药大学,南宁 530001)
苦参碱(Matrine)是从豆科植物苦参(sophora flaescens Ait)、苦豆子(S.alopecuroides L)及广豆根(S.subrostrata)中分离出来的生物碱,是白金雀八碱的异构体,属于四环的喹嗪啶类,分子式为C15H24N20,是苦参的主要成分。已有研究发现,苦参碱有抗心律失常作用[1],能拮抗乌头碱、氯化钡、哇巴因、肾上腺素以及结扎左冠状动脉前降支诱发的心律失常,且其抗心律失常作用随剂量的增加而加强,其对乌头碱所致的心律失常作用尤佳,但确切的抗心律失常机制尚不明确。本研究应用标准微电极技术和细胞膜片钳全细胞记录技术,观察在乌头碱诱发心律失常的条件下,苦参碱对豚鼠心室肌动作电位及细胞膜钠通道(INa)的作用,研究其抗心律失常的作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物
豚鼠,雌雄不限,体重300g~400g,由泸州医学院实验动物中心提供。
1.2 主要药品与试剂
苦参碱购于国家标准物质网,纯度大于99%,用水溶解;Collagenase II购于 Worthington公司;HEPE购于sigma试剂公司。
1.3 方法
1.3.1 豚鼠心室乳头肌动作电位的记录[2]
将豚鼠击头致昏后,迅速分离心脏置于100%O2饱和的台式液中(mmol·L-1:NaCl 147,KCl 5.4,CaCl21.8,MgCl21.05,HEPES 10,Glucose 11,NaOH调节 pH至7.4),快速分离心室乳头肌后固定于恒温浴槽中,以持续 100%O2、温度为 36℃ ±0.5℃的台氏液灌流,流速3ml·min-1,平衡2h后用于实验。用铂金电极置于肌条的两侧作为刺激电极,用有芯玻璃毛细管(Havard,USA)在拉制仪(P-97,Sutter,USA)上进行拉制,将充灌 3mol·L-1KCl的玻璃微电极(阻抗 20~30 MΩ)插入 Ag-AgCl引导电极,固定于三维微操纵器(Narishige,Japan)上,用参比电极接地。电极入水后……
