李旭东 李桂玲 宋贯杰

实体肿瘤的增殖和转移依赖于新生血管的生成，受血管生成刺激因子和抑制因子的双重调节。内皮抑素(Endostatin)是一种内源性血管生成抑制因子，能特异抑制血管内皮细胞增殖和血管生成，肿瘤微血管密度(microvessel density，MVD)是衡量血管生成的定量指标，但MVD与RCC预后是否相关，以往文献报道的结果并不一致［1～3］。本研究检测RCC组织与癌旁组织Endostatin和MVD，并分析其与RCC病理类型、分级、临床分期之间的关系，以期为临床评估RCC提供客观预后指标，并为RCC的抗血管治疗提供研究依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择笔者所在医院2009年1月～2010年9月手术切除肾细胞癌组织标本且临床资料齐备者45例。男25例，女20例;年龄35～78岁，平均64.6岁。按WHO分级标准，G1 15例，G2 20 例，G3 10 例。采用 Robson分期［4］，Ⅰ期12例，Ⅱ期14例，Ⅲ期11例，Ⅳ期8例。经病理证实，透明细胞肾癌26例，嫌色细胞肾癌13例，嗜色细胞癌6例。另取肿瘤旁＞2 cm区域的正常肾组织35例作为正常对照组。病例纳入标准:(1)手术时未作放疗、化疗或其他针对肿瘤的生物治疗;(2)行根治性手术，术后病理证实为肾细胞癌，组织学分类明确;(3)术后石蜡标本保存完好，有足够待测组织。

1.2 实验方法

1.2.1 Endostatin检测 术后标本分别取肿瘤组织和肿瘤旁正常肾组织，脱水后石蜡包埋，连续切片，采用免疫组化SP法检测两组标本中Endostatin。Endostatin蛋白阳性表达为棕黄色颗粒，主要存在于细胞浆(即肿瘤细胞胞浆棕染)。记分标准参照许良中等［5］的方法，随机选根据细胞浆的着色程度及着色细胞的百分率进行评分。

1.2.2 MVD检测 采用weidner法［6］，用 CD34抗体标记微血管，计数肿瘤内着色的毛细血管和微小血管。……