韩 影，刁文卓，陈 萍

（吉林市中心医院1.病理科；2.神经外科，吉林 吉林 132011）

脑胶质瘤中VEGF、EGFR表达意义研究

韩 影1，刁文卓2，陈 萍1

（吉林市中心医院1.病理科；2.神经外科，吉林 吉林 132011）

脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，脑胶质瘤的主要特征是在脑实质中浸润性生长，可通过破坏血脑屏障向脑组织侵袭性生长，其侵袭性强、术后复发快、病死率高，临床通过手术、放化疗及中医治疗疗效仍不尽人意。其预后的关键是肿瘤的分级，大量研究结果表明脑胶质瘤的恶性程度与肿瘤血管的生长密切相关。肿瘤血管的生成是一个复杂的过程，受多种因子的调节。VEGF是目前已知的作用最强的肿瘤血管生成诱导因子，并可使血管通透性增加。EGFR是一种酪氨酸激酶活性的膜表面受体，在人脑恶性胶质瘤中常常出现扩增、重排、突变和过度表达，借助于信号转导使细胞生长失控和转化。本研究通过分析脑胶质瘤中VEGF和EGFR的表达，进一步探讨其在脑胶质瘤中的发生、发展和侵袭的意义。

1 材料与方法

1.1 材料收集我院2007－2010年间病理科诊断为胶质瘤的存档蜡块48例，年龄6－70岁，中位年龄43岁，其中男性31例，女性17例，以2000年WHO脑胶质瘤分类标准，中低度恶性即低级别组（WHO I、II级）胶质瘤28例；高度恶性即高级别组（WHO III、IV级）胶质瘤20例。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂 VEGF鼠抗人单克隆抗体、EGFR鼠抗人单克隆抗体，SP染色试剂盒和DAB试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司。

1.2.2 主要仪器 免疫组化配套仪器，石蜡切片机，电热恒温干燥箱，光学显微镜。

1.2.3 免疫组化染色 所有切片均为2.5μm厚连续切片，取一组行HE染色并校对脑胶质瘤病理级别，再行SP免疫组化法检测VEGF和EGFR。

1.2.4 结果判定 采用半定量双盲法，根据显微镜下免疫组化阳性细胞染色进行评价，EGFR阳性反应为细胞膜和细胞浆呈棕褐色、颗粒状；VEGF阳性反应为细胞膜或细胞浆呈棕褐色。每张切片随机观察5个高倍视野，每个视野计数100个肿瘤细胞，阳性细胞数≥50%为强阳性（＋＋＋），49%～25%为阳性（＋＋），25%～5%为弱阳性（＋），＜5%为阴性（－）。

1.2.5 统计方法 本实验采用SAS 6.12统计学软件进行统计学处理，实验数据采用χ2检验，以P＜0.05为差异有显著性，P＜0.01为差异极显著。

2 结果

2.1 VEGF在脑胶质瘤中的表达VEGF免疫组化表达阳性颗粒呈棕褐色。弥散分布于肿瘤细胞膜或细胞浆内。结果表明：VEGF在正常脑组织中阳性率表达为9.62%，在胶质瘤组织中阳性率表达为60.00%，统计学P＜0.01，具有显著性差异性。低级别组与高级别组差异具有显著性（χ2＝14.69，P＜0.05），见表1。

表1 VEGF在各级脑胶质瘤中的表达

2.2 EGFR在脑胶质瘤中的表达EGFR免疫组化表达阳性颗粒呈棕褐色颗粒。主要位于细胞膜和细胞浆内，结果表明：EGFR在正常脑组织中无表达，在胶质瘤组织中阳性率表达为54.17%，统计学P＜0.01，具有显著性差异性。低级别组与高级别组差异具有显著性（χ2＝14.13，P＜0.01），见表2。

2.3 VEGF与EGFR表达相关经χ2检验胶质瘤组织中VEGF的表达与EGFR的表达χ2＝21.78，P＜0.05，有相关性，见表3。

表2 EGFR在各级脑胶质瘤中表达

表3 VEGF、EGFR相关分析

3 讨论

VEGF是体外血管内皮细胞生长特异的有丝分裂原和血管通透性因子。肿瘤细胞生长依赖于供应血管提供氧气和营养，运走代谢产物。最近研究表明VEGF在组织器官的发生、正常状态的维持、多肿瘤的发生、发展以及转移中都发挥着重要作用。Bruce和Criscuolo首先证实胶质瘤细胞合成与分泌VEGF［1］。本实验研究结果提示VEGF的阳性表达对于判断肿瘤的恶性程度非常有意义，同时本实验还观察到，不但肿瘤细胞胞浆内有棕黄色染色，新生血管旁也有较强染色，为解释该现象，Disalvo等人对VEGF结合位点进行了超微研究，表明VEGF是以旁分泌方式作用于肿瘤旁血管内皮细胞膜上的靶受体，揭示VEGF是一种重要的旁分泌血管生长因子，说明VEGF在脑肿瘤的发生过程中发挥作用。

EGFR在大多数肿瘤中的表达和突变，借助于信号转导使细胞生长失控和恶性化［2］。PM Ganigi［2］等研究了EGFR在胶质瘤中的表达率为25%，有EGFR基因的扩增。近期国外文献报道应用EGFR基因单克隆抗体治疗胶质瘤［4］，在胶质瘤治疗方面应用酪氨酸激酶抑制剂和单克隆抗体治疗胶质瘤在实验室中已取得很好的疗效。本实验表明EGFR的阳性表达与胶质瘤的恶性度呈正相关，是胶质瘤分化不良的重要标志，EGFR阳性表达的肿瘤可能具有更强的分裂增殖活性。EGFR作为胶质瘤恶性程度的生物学指标，也可作为判断预后的重要参数之一。

研究表明EGFR在膜信息转换中期重要的作用，过度表达的EGFR不断将VEGF刺激导入细胞内，引起细胞持续分裂增殖，最终导致肿瘤的发生，本实验研究经相关分析认为胶质瘤组织中VEGF的表达与EGFR的表达（P＜0.05）有相关性。这进一步说明了，二者在胶质瘤发生中有协同作用。

［1］Bruce JN，Criscuolo GR，M errrili MJ，et al.Vascular permeability induced by protein product of malignant brain tumors：inhibition by dexamethasone［J］.J Neuro surg，1987，67：880.

［2］Roy SH.Monoclonal antibody to target epidermal growth factor receptor positive tumors［J］.Cancer，2002，94（5）：1593.

［3］PM Ganigi，V Santosh，B Anandh，et al.Expression of P53、EGFR、pRd and bcl-2protens in pediatric Glioblastoma Multiforme：A Study of 54Patients［J］.pediatric Neuosurgery，2005，41：292.

［4］Kies MS，Arquette ma，Nabell L，et al，Final report of the efficacy and safety of the antiepidermal growth factor antibody Erbitux（IMC2C225），in combination with cisplatin inpatients with recurrent squamous cell carcinoma of the head and neck（SCCHN）refractory to cisplatining chemotherapy［J］.proc Am Soc Clin Oncol，2002，21：232.

1007－4287（2012）02－0320－02

2010－10－17）