杨渝伟 薛冰蓉 陈小红 俸家富

四川省绵阳市中心医院检验科，四川绵阳 621000

多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是以骨髓中克隆性浆细胞恶性增殖和异常积累为特征的肿瘤，约占血液肿瘤的10%。染色体异常在该病中有极高的发生率且有独立的预后判断价值，但是传统细胞遗传学方法检测到染色体异常率只占初诊患者的1/3左右。荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）技术能对间期细胞进行分析，克服传统方法的缺陷，大大提高核型异常检出率。本研究应用该技术检测39例MM初诊患者，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2008年6 月～ 2009 年9月四川省绵阳市中心医院MM初诊患者39例，其中男24例，女15例，年龄36～80岁，中位年龄61.5岁。诊断标准依据中国多发性骨髓瘤工作组发布的《中国多发性骨髓瘤诊治指南》（2008版）[1]。ISS分期Ⅰ期9例，Ⅱ期17例，Ⅲ期13例；DS分期Ⅰ期7例，Ⅱ期15例，Ⅲ期17例；免疫球蛋白类型IgG型19例，IgA型10例，轻链型7例，不分泌型3例。对照组15例为非血液系统恶性疾病患者，其中男9例，女6例，年龄26～65岁，中位年龄57.5岁。

1.2 探针

多发性骨髓瘤FISH检测试剂盒购自北京金菩嘉生物有限公司，内含针对1q21区带的序列特异性探针1q21、针对13q14区带的序列特异性探针RBl（视网膜神经胶质瘤基因）和D13S319、针对14q32区带的序列特异性探针IGH和针对17p13区带的特异性探针p53。标记探针-20℃保存备用。

1.3 标本的处理

选取新鲜骨髓涂片（涂片均匀、勿厚）晾干后，56℃烤片10～20 min，100%甲醇浸泡5 min，100%乙酸浸泡30 min，室温2xSSC液洗片2次各5 min，56℃老化玻片30～60 min或室温下过夜老化玻片。老化好的玻片先后置37℃新鲜配制的RNase A溶液和盐酸胃酶溶液中分别孵育30 min和10 min，2xSSC溶液洗片2次各5 min，依次置于-20℃的70%乙醇、85%乙醇和100%乙醇中梯度脱水各2 min，晾干后加热至56℃，进行杂交试验。……