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新城疫病毒核酸检测标准物质研究

2012-08-16高志强张鹤晓乔彩霞张利峰

中国动物检疫 2012年11期
关键词:标准检测方法

谷 强,张 伟,高志强,张鹤晓,刘 环,蒲 静,乔彩霞,张利峰

(北京出入境检验检疫局,北京 100026)

鸡新城疫是强毒力新城疫病毒引起的鸡的急性、热性、高度接触性的败血性传染病。新城疫病毒可自然感染人、猪和犬等哺乳动物,严重危害养鸡业[1]。我国主要采用疫苗控制新城疫的流行,疫苗所采用的毒株大多是新城疫弱毒株。疫苗免疫后,在一定时间内鸡群中存在弱毒疫苗株,因此,快速的诊断和鉴别检测新城疫强毒株和疫苗株对于防控新城疫具有十分重要意义。

随着新城疫病毒致病力分子生物学基础的深入研究,使得核酸检测鉴别毒株毒力强弱成为可能。许多学者根据病毒F0切割位点的特定序列建立了核酸检测方法并研制出试剂盒。目前各检测单位在采用分子生物学方法对新城疫病毒中强毒株进行鉴别检测时,由于人员问题、设备问题或者采用的方法和试剂不尽相同,结果有时会有差异。因此研制相关核酸检测标准物质通过测量审核或能力验证的方式对设备、人员以及方法和试剂等进行验证或考核具有重要意义。

本研究采用制备体外转录RNA制备新城疫病毒核酸检测标准物质,不涉及生物安全问题,在实际检测中,可在逆转录和PCR扩增2个方面进行质量控制。一方面为相关检测实验室在鉴别这2类毒株提供参比标准品,可用于评定实验室鉴别诊断中强毒力新城疫病毒和新城疫病毒疫苗毒的能力。另一方面可用于实验室进行质量控制和量值传递提供参比品。……

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