刘蕴华 徐征

慢性骨髓增殖性疾病(MPD)是一组以一系或多系髓系细胞增殖为主要特征的克隆性造血干细胞疾病。以慢性粒细胞白血病(CML)、真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)及特发性骨髓纤维化(MF)最常见。病因仍然不十分清楚，除慢性粒细胞性白血病(CML)具有特征性的Ph染色体和BCR/ABL融合基因以外，其余均缺乏特征性分子诊断标志。2005年几个研究小组［1-3］分别报道，在BCR/ABL阴性骨髓增生性疾病(MPD)患者中存在JAK2基因的点突变-JAK2V617F，这一基因突变的发现和研究改变了MPD的分类和诊断，WHO 2008年修订的 MPD诊断标准中已把JAK2V617F突变列为首选检测项目，有无 JAK2突变成为MPD主要的诊断指标［4］。我们对我院25例MPD患者进行JAK2V617F检测，并初步探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2010年1月1日至2011年10月30日在本院血液科拟诊的骨髓增殖性疾病(MPD)患者25例为研究组，其中男12例，女13例，中位年龄58岁(36～87岁)。经骨髓细胞形态学、组织化学、骨髓病理、染色体、BCR/ABL融合基因等检查确诊，符合WHO 2008年修订的MPD诊断标准［4］:真性红细胞增多症(PV)13例，原发性血小板增多症(ET)12例。15例对照组为缺铁性贫血继发血小板增多5例(补铁治疗后血小板恢复正常)，慢性粒细胞性白血病5例、急性白血病5例包括急性淋巴细胞白血病2例、急性髓系白血病M2a 2例、M4 1例。

1.2 标本采集 抽取患者骨髓2～3 ml或外周血3～5 ml，EDTA抗凝，2℃～8℃冷藏运输，24 h内送广州金域进行检测。

1.3 检测方法

1.3.1 JAK2V617F定性检测 应用等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR)进行JAK2基因突变定性检测。从送检样本中提取基因组DNA，采取等位基因特异性PCR扩增，经琼脂糖凝胶电泳，通过扩增片段大小的不同来判断基因状态。……