张建坤 庞国莲 陈昊宾 罗贤勇

（云南省曲靖市第一人民医院，云南 曲靖 655000）

大肠癌是我国常见的消化道恶性肿瘤之一，其发病率有逐年升高趋势，且发病年龄年轻化，大肠癌的发生、发展与癌基因的激活、抑癌基因的失活、基因的突变或丢失及蛋白的过度表达等密切相关[1]。本文应用免疫组化方法检测和分析S-100蛋白在大肠癌中的表达，旨在探讨其与大肠癌发生发展的相关性。

1 材料与方法

1.1 研究对象

收集云南省曲靖市第一人民医院病理科2009年9月至2011年6月期间有明确病理诊断的大肠癌手术标本46例。并收集该46例大肠正常组织标本作为对照组。年龄32岁～70岁，中位年龄51岁。

1.2 方法

采用链菌素亲生物素-过氧化酶法（S-P法）：石蜡切片先经过二甲苯脱蜡，后梯度乙醇水化。再将切片置于10mmol/L柠檬酸钠缓冲液（pH=6.0）内，高温高压抗原修复2min；一抗采用1∶100稀释的S-100兔抗人多克隆抗体（购自福州迈新生物技术有限公司）。4℃温育过夜。其余步骤按常规免疫组化S-P法进行，DAB显色，苏木素复染。乙醇梯度脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。阴性对照采用PBS液代替第一抗原，用已知阳性组织切片作阳性对照。所有对照均与实验标本在相同条件下进行免疫组化染色。

1.3 结果判定

S-100蛋白表达定位于细胞核或细胞浆，呈棕黄色颗粒状。每张切片根据染色强度进行评分：无色（-）为阴性；浅黄色（±）为弱阳性；黄色（+）为阳性；棕黄色（++）强阳性。对照组大肠正常粘膜组织亦根据染色强度进行评分。

1.4 统计学处理

应用spss 16.0 for windows对数据进行统计分析，χ2检验或作相关分析，以P＜0.05为差异显著性标准。……