何乐春 重庆医疗器械质量检验中心 （重庆 401147）

0.前言

碱性磷酸酶（ALP）广泛分布于人体各脏器官中，主要存在于肝脏、骨骼成骨细胞、胎盘、肾脏、肠壁等。其中以肝脏为最多，其次为肾脏、骨骼、肠和胎盘等组织。血清中的ALP主要来自肝脏和骨骼。生长期儿童血清内的大多数来自成骨细胞和生长中的骨软骨细胞，少量来自肝。ALP也是目前免疫诊断试剂产品最常用的标记酶之一，临床上测定ALP主要用于骨骼、肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断，尤其是黄疸的鉴别诊断。对于不明原因的高ALP血清水平，可测定同工酶以协助明确其器官来源。ALP测定试剂盒则用于体外定量检测人血清或血浆中碱性磷酸酶的活性，在临床上作辅助诊断用。

1.试验过程

1.1 碱性磷酸酶试剂盒说明

试剂盒里试剂为双试剂，即分别由R1（缓冲液，主要成分为2-氨基-2-甲基-1-丙醇）、R2（底物，主要成分为对硝基苯磷酸盐）组成。

1.2 试验原理

对硝基磷酸盐在PH10.4且有镁离子存在的环境下，可以被ALP水解成p-NP，p-NP在405nm处有特异性吸收，且由p-NP引起的吸光度上升的速率与ALP的活力成正比。

（1）试验依据：采用企业注册标准《碱性磷酸酶试剂盒》中对“试剂空白吸光度”的试验方法，同时结合产品说明书进行试验。

试剂空白吸光度：将R1试剂与R2试剂以5:1混合配制成应用试剂，用蒸馏水调整分光光度仪的零点后，测定试剂在波长405nm、1cm比色池、37℃条件下稳定30s后的吸光度，测定3次，取其平均值作为应用试剂的空白吸光度，吸光度值应≤0.6。

（2）试验试剂：严格按照产品说明书中对ALP的检验方法要求，即R1:R2:质控血＝25:5:1配制成试验试剂。……