APP下载

冻融法提取脾脏转移因子影响因素的试验

2012-08-07刘宗柱

中国兽医杂志 2012年1期

刘 尧,刘宗柱

(青岛农业大学生命科学学院,山东 青岛 266109)

转移因子(Transfer factor,TF)是免疫活性淋巴细胞所释放的参与机体免疫功能的多肽与寡聚核苷酸的混合物,可以将供体的免疫特性转移给受体的淋巴细胞,从而提高机体免疫功能。兽医临床常用以提高机体免疫机能以及解除免疫抑制[1-2]。TF提高机体免疫力的作用无种属特异性,可以在不同种属的动物之间相互转移免疫信息。随着我国畜禽养殖中免疫抑制性疾病的多发,TF相关制剂的应用愈发具有重要的临床意义。目前,制备TF的原料较多应用的是猪、肉鸡等动物的脾脏,制备工艺多采用反复冻融、高压均质、离心、透析或超滤等工艺,但目前对转移因子提取效率的影响因素方面的研究很少报道。本试验以猪脾脏为试验原料,主要研究了冻融次数、透析时间及匀浆介质对猪脾脏转移因子中多肽及核酸含量的影响,以期为猪脾脏TF制备工艺的优化提供借鉴。

1 材料与方法

商品猪新鲜脾脏(购自金锣食品集团公司屠宰场);UV-2401PC型紫外分光光度计(日本岛津);透析袋(21mm,USA进口);绞肉机;组织匀浆机。

1.1 试验材料及预处理 猪脾脏购自山东金锣食品集团公司屠宰场,-20℃保存备用。试验时将猪脾脏去筋膜、脂肪,剪碎,等分为不同匀浆介质的两组,其中一组按组织湿重1∶1的比例加入生理盐水,另一组按组织湿重1∶1的比例加入去离子水,分别置绞肉机中搅碎,转移到组织捣碎机中匀浆,备用。

不同匀浆介质处理后的脾脏匀浆分别装于数支5mL聚乙烯离心管中,分别设置冻融4、6、8、10、12次;……

登录APP查看全文