王丰伟，薛佩佩（1.瑞安市人民医院，浙江瑞安3500；.温州医学院，浙江温州35035）

二乙酰氨乙酸乙二胺注射液为我国自行研制的止血药，能促使纤维蛋白原变为纤维蛋白，并能促使血小板释放凝血活性物质，加速血液凝固。主要应用于消化道出血、眼鼻出血、妇科出血、痔疮出血、外科出血等，均有较好疗效，已广泛应用于临床[1]。我院临床上常将二乙酰氨乙酸乙二胺注射液与果糖氯化钠注射液、5%果糖注射液、5%转化糖注射液配伍使用，故考察其稳定性具有一定的临床意义。由于目前尚无相关报道，本文通过外观性状、pH值及含量变化，考察其配伍稳定性，为临床用药提供参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器

BECKMAN-126型高效液相色谱仪，包括125泵、166检测器（美国贝克曼库尔特有限公司）；电热恒温水温箱（上海医用恒温设备厂）；AB104-S电子天平（上海帅宁仪器有限公司）；PHSJ-4型酸度计（上海雷磁仪器厂）；TU-1901型双光束紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。

1.2 试药

果糖氯化钠注射液（南京小营药业集团有限公司，规格：500m L，批号：2010041501）；5%果糖注射液（江苏正大丰海制药有限公司，规格：250m L，批号：1007091）；5%转化糖注射液（四川美大康佳乐药业有限公司，规格：250 m L，批号：10102362）；二乙酰氨乙酸乙二胺注射液（华北制药股份有限公司，规格：300mg，批号：101203）；二乙酰氨乙酸乙二胺对照品（中国食品药品检定研究院，批号：100795-200401）；乙腈为色谱纯，磷酸二氢钾为分析纯。

2 方法与结果[2]

2.1 色谱条件

色谱柱：ODS2（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-0.05 mol·L－1磷酸二氢钾（2∶98，pH2.3）；流速：1.0m L·min－1；检测波长：210 nm；柱温：30℃，进样量：20μL。

2.2 溶液的制备

2.2.1 二乙酰氨乙酸乙二胺贮备液：准确称取二乙酰氨乙酸乙二胺对照品30mg，置于10m L量瓶中，甲醇溶解并定容，即得3mg·m L－1对照品溶液。

2.2.2 配伍液：取2支二乙酰氨乙酸乙二胺注射液，分别加5%果糖、果糖氯化钠、5%转化糖注射液（各3份）中溶解，摇匀，制得浓度为2 400μg·m L－1的溶液。

2.3 标准曲线的制备

精密量取“2.2.1”项下二乙酰氨乙酸乙二胺贮备液0.25、0.5、1、1.5、2、2.5m L，分别置于10m L 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得到对照品溶液A、B、C、D、E、F。在“2.1”项色谱条件下，分别取20μL进样测定，记录峰面积，以浓度（c）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标，求得回归方程A＝6 950.757c+50 512.13（r＝0.999 8）。结果表明二乙酰氨乙酸乙二胺检测浓度在75～750μg·m L－1范围内与峰面积呈良好的线性关系。

2.4 精密度试验

取“2.3”项下二乙酰氨乙酸乙二胺对照品溶液B，按含量测定方法，连续进样测定6次，计算得峰面积的RSD为0.32%。

2.5 回收率试验

精密量取“2.3”项下3种不同浓度的对照品溶液（B、C、D）各2m L（每个浓度取3份），加入精密量取的已知浓度二乙酰氨乙酸乙二胺样品溶液2m L，共取9份，摇匀，分别直接进样测定，代入相应的回归方程，计算加样回收率，结果见表1。

表1 回收率试验结果（n＝9）Tab 1 Resultsof recovery tests（n＝9）

2.6 干扰试验

将5%果糖注射液、果糖氯化钠注射液、5%转化糖注射液与二乙酰氨乙酸乙二胺注射液及其配伍液用纯化水稀释到适宜的浓度，按“2.1”项色谱条件进样，结果果糖、转化糖与二乙酰氨乙酸乙二胺的色谱峰能较好地分离、无干扰。色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图A.5%果糖注射液；B.果糖氯化钠注射液；C.5%转化糖注射液；D.二乙酰氨乙酸乙二胺注射液；E.5%果糖与二乙酰氨乙酸乙二胺配伍液；F.果糖氯化钠与二乙酰氨乙酸乙二胺配伍液；G.5%转化糖与二乙酰氨乙酸乙二胺配伍液；1.果糖；2.二乙酰氨乙酸乙二胺Fig 1 HPLC chromatogram sA.5%Frutose injection；B.Frutose and sodium chloride injection；C.5%Calorose injection；D.Erthylenediamine diaceturate injection；E.5%fructose mixed with ethylenediamine diaceturate solution；F.fructose and sodium chloride mixed with ethylenediamine diaceturate solution；G.5%calorosemixed with erthylenediamine diaceturate solution；1.frutose；2.erthylenediamine diaceturate

2.7 配伍液稳定性试验

取“2.2.2”项下9份配伍液，置于30℃恒温水浴箱中，分别于0、0.5、1、2、4、6 h时取样，作以下考察。

2.7.1 外观性状、pH值变化考察：5%果糖、果糖氯化钠、5%转化糖注射液分别作对照，用纳氏比色管观察颜色变化并测定pH值。结果表明，3种配伍液放置于30℃恒温水浴箱中6 h内无颜色变化，外观透明澄清，无沉淀、气体和混浊产生，pH值变化结果见表2。

表2 3种配伍液的pH值随时间变化结果Tab 2 pH value of 3 kinds of mixtures at different tim e points

2.7.2 含量变化：分别取3种配伍液，稀释10倍得二乙酰氨乙酸乙二胺浓度为240μg·m L－1的试验样品，各试验样品进样3次，以峰面积平均值代入回归方程，得出不同时间的药物浓度，以配伍即刻（0 h）的含量为100%，计算各时间点2种组分的相对含量。结果见表3。

表3 3种配伍液中二乙酰氨乙酸乙二胺的相对含量变化结果Tab 3 Relative contents of erthylenediamine diaceturate in 3 kinds of mixtures

2.8 配伍结果

二乙酰氨乙酸乙二胺与3种输液的配伍液在6 h内其外观性状、pH值均无明显的改变。与5%转化糖注射液配伍的溶液基本稳定，在6 h内含量无明显的改变；与果糖氯化钠注射液配伍的溶液稳定性稍差，在2 h内含量无明显的改变；与5%果糖注射液配伍的溶液稳定性差，不宜配伍使用。

3 讨论

由于夏天温度偏高，药品被降解的速度可能会加快，故选30℃恒温水浴箱作为储藏温度。

本试验提示，二乙酰氨乙酸乙二胺与5%转化糖注射液配伍后应在6 h内输注完毕，与果糖氯化钠注射液配伍后应在2 h内输注完毕，不可与5%果糖注射液配伍使用。

本试验的流动相尝试过多种，有甲醇-水、乙腈-水、甲醇-磷酸二氢钾等，但最终使用乙腈-0.5mol·L－1磷酸二氢钾（2∶98）为流动相时二乙酰氨乙酸乙二胺与这3种注射液分离的效果较好，因此选用其作为本试验流动相。

[1]周文艳，赵少玲.高效液相色谱法测定二乙酰氨乙酸乙二胺注射液的有关物质[J].安徽医药，2005，9（1）：43.

[2]杨继章，赵增仁.注射用加替沙星与酚磺乙胺注射液的配伍稳定性考察[J].中国药房，2008，19（2）：116.