杜亚楠，涂晓嵘，胡志斌，李庆蒙，魏赛金，2*

(1．江西农业大学 生物科学与工程学院/南昌市发酵应用重点实验室，江西 南昌 330045;2．江西农业大学 作物生理生态与遗传育种教育部重点实验室，江西 南昌 330045)

灵芝(Ganoderma lucidum)是名贵药用真菌，自古被誉为延年益寿之佳品，功可补气益血，养血安神、临床应用非常广泛［1］。硒是人体必需的微量营养元素之一，缺硒会直接导致人体免疫能力下降。临床医学证明，威胁人类健康和生命的四十多种疾病都与人体缺硒有关［2－5］。

本文以大豆为原材料接种富硒灵芝液体种子，探索大豆固体发酵产氨基酸新工艺，为开发大豆既富含游离氨基酸，又含灵芝多糖及微量有机硒的高营养价值食品提供了新思路。

1 材料与方法

1．1 材料

1．1．1 菌种 灵芝730(江西农业大学生物科学与工程学院实训基地提供)。

1．1．2 主要试剂与仪器 抗坏血酸、氨基酸标准液、茚三酮试剂、亚硒酸钠，以上均为分析纯。722型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)等。

1．1．3 供试培养基 斜面培养基:PDA培养基［6］;一级液体种子培养基:去皮土豆300 g，蔗糖20 g，酵母膏 2．0 g，大豆蛋白胨 5．0 g，KH2PO41．0 g，MgSO4·7H2O 2．0 g，pH 5．5，蒸馏水 1 000 mL;二级液体种培养基:蔗糖80 g，大豆蛋白胨5．0 g，酵母膏5．0 g，KH2PO41．0 g，MgSO4·7H2O 0．5 g，NaCl25 g，土豆200 g，pH 5．5，蒸馏水1 000 mL;固体发酵培养基［7］:浸泡过夜的大豆洗净，沥干水分，在250 mL三角瓶中分别盛不同重量的浸泡过夜的大豆，121℃灭菌30 min，备用。

1．2 方法

1．2．1 菌种的活化［8］取实验室冰箱保存的灵芝菌种，接种于PDA斜面，置于30℃恒温培养箱培养7 d，即得活化斜面菌种。

1．2．2 灵芝液体菌种的制备 从活化好的斜面中挖取0．5 cm2左右的菌块1～2块，接入一级液体培养基中，装液量为50 mL/250 mL。……