林东红 崔兆磊 孔令英 林振兴 胡建达 (福建医科大学检验医学系，福州350004)

舒尼替尼(SU11248)，全称苹果酸舒尼替尼(Sunitinib malate)，商品名索坦(Sutent)，是美国辉瑞(Pfizer)公司推出的一种新型多靶点血管生成抑制剂。2006年1月获得FDA批准上市。该药作为分子靶向药物用于恶性肿瘤的治疗，已成为当前研究的热点。其通过靶向性抑制多种酪氨酸激酶和生长因子受体，阻断多种信号通路，而起到抑制肿瘤血管生成和肿瘤细胞增殖的作用。临床研究表明，该药具有广谱的抗肿瘤活性，尤其对肾细胞癌、胃肠道间质瘤、乳腺癌等实体性肿瘤具有良好的抑制效果。本实验拟研究SU11248对慢性骨髓性白血病K562细胞的作用，探究相关分子机制，为该药作为抗肿瘤新药应用于临床提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 主要试剂 RPMI1640培养基、胎牛血清FBS购自Hyclone公司。SU11248购自Biocompound公司，溶解于二甲亚砜(Dimethylsulfoxide)，-20℃避光保存。CCK-8试剂盒为日本同仁产品。细胞周期试剂盒购自南京凯基。兔抗人Bcl-2、Bax单抗及鼠抗人p73单抗购自Abcam公司，兔抗人Caspase-3、Caspase-9多抗及鼠抗人p53单抗购自Santa Cruz公司。DAPI染液、免疫荧光染色试剂盒、兔抗人NF-κB p65单抗、鼠抗人Cyto C、β-actin单抗购自江苏碧云天。

1.1.2 细胞株 人慢性骨髓性白血病K562细胞株购自中科院上海细胞库，由福建省血液研究所传代保存。用含10%FBS的 RPMI1640培养基，置37℃，5%CO2温箱及饱和湿度条件下培养，2～3天换液传代1次。

1.2 实验方法

1.2.1 CCK-8比色法检测SU11248对 K562细胞增殖的影响 取对数期细胞按5×103个细胞/孔接种至96孔培养板，体积100μl。实验设药物组(SU组)、二甲亚砜组(排除药物溶剂毒性)及空白对照组，每组5个复孔。……