马才敬 ，方 谨 ，李玲玲 ，王 允

(1.四川泰华现代中药所，四川 成都 618300; 2.重庆邮电大学，重庆 400065)

骨碎补为水龙骨科植物槲蕨 Drynaria fortunei(Kunze)J.Sm.的干燥根茎，全年均可采挖，除去泥沙，干燥，或者再燎去茸毛(鳞片)。骨碎补性味苦温，归肾、肝经，具有补肾强骨、续伤镇痛功效，用于肾虚腰痛、筋骨折伤、耳鸣耳聋、跌打闪挫、牙齿松动，外治斑秃、白癜风等症。槲蕨根茎含淀粉16.4%，葡萄糖5.37%，还含主要活性成分柚皮苷[1]。笔者建立了测定药材中柚皮苷含量的高效液相色谱法，并优化了炮制骨碎补的提取纯化方法，报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 1200型高效液相色谱仪。柚皮苷对照品(由重庆中药研究院提供，批号为110722－200309，供含量测定用);乙腈为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。砂炮骨碎补购于南坪医药公司，经重庆邮电大学生物信息学院中药鉴定学刘毅老师确认为槲蕨科骨碎补。

2 方法与结果

2.1 柚皮苷含量测定

2.1.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:Phenomenex C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:乙腈－水－冰乙酸(27∶72∶1);流速:1 mL/min;柱温:30℃;测定波长:283 nm;进样量:5 μL。在此条件下，理论板数按柚皮苷峰计算应不低于3000，保留时间为4.712 min，色谱图见图1。

2.1.2 溶液制备

取本品粗粉约0.2 g，精密称定，置锥形瓶中，加甲醇30 mL，加热回流3 h，放冷，滤过，滤液置50 mL量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液。精密称取柚皮苷对照品0.6 mg，置10 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得每1 mL含柚皮苷0.6 mg的对照品溶液。

2.1.3 方法学考察

图1 高效液相色谱图

线性关系考察:分别精密吸取柚皮苷对照品溶液(0.6 g/L)2，4，6，8，10，12 μL，注入高效液相色谱仪，测定峰面积。……