盛 瑜，韩国庆，秦成勇，任万华，刘 慧，王夏青

山东大学附属省立医院1.感染性疾病科;2.消化内科，山东济南250012

目前研究发现，在正常人肝细胞中存在γ-GGT不同的基因亚型:胎肝型(F)、胎盘型(H)、肝癌细胞型(P)亚型，并与肝癌发展密切相关［1］。根据国内外研究发现，熊去氧胆酸(UDCA)对人宫颈癌细胞有诱导凋亡作用，并可抑制致癌物对实验动物的致癌作用［2-3］。在此基础上，研究发现UDCA能选择性诱导人肝肿瘤细胞凋亡及抑制增殖［4］。在上述系列研究中，本实验主要研究UDCA对大鼠肝癌模型中肝癌标志物GGT基因表达的影响作用，进一步探讨UDCA对肝癌预防作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料 Wister大鼠106只，雄性，年龄3.5个月，体质量(95.9±5.6)g，购于山东大学动物实验中心。二乙基亚硝胺(DEN)，UDCA及逆转录酶和PCR试剂，均为Sigma产品。

1.2 大鼠肝癌模型的建立 将106只Wister大鼠随机分成5组:① 模型组28只;② UDCA实验A组28只;③UDCA实验B组28只;④正常对照组11只;⑤UDCA对照组11只。①②③组为实验组，④⑤组为对照组。模型组在正常饮水、进食状态下饲养2周，于第3周开始给予每只大鼠腹腔注射DEN溶液(2 g/L)，剂量为20 mg/kg，每周1次，共2周;于第5周增加DEN剂量为40 mg/kg;第7周始增加DEN剂量为60 mg/kg，按上述方法注射2周。之后在正常饮食下饲养至20周，总时间为28周。UDCA实验A组将UDCA用饮用水配成2 g/L的浓度，给大鼠饮用2周，于第3周给予腹腔注射DEN溶液，剂量、用法和时间与模型组相同。UDCA实验B组UDCA的浓度增加为5 g/L，其他处理与UDCA实验A组相同。正常对照组不给予大鼠任何处理。UDCA对照组除不用DEN腹腔注射外，其余处理同UDCA实验B组。

1.3 大鼠的处死及处理 大鼠肝组织的采集:将大鼠处死，取各组大鼠肝组织、癌周组织及癌组织标本，以无RNA酶的三蒸水冲洗后置于EP管中，转移至－80℃冰箱保存，供提取GGT mRNA。……