胡尔西丹·伊麻木 艾克热木·艾合买提 热娜·卡斯木 阿吉艾克拜尔·艾萨

1．中国科学院新疆理化技术研究所，新疆 乌鲁木齐 830011;2．中国科学院研究生院，北京 100039;3．新疆医科大学药学院，新疆 乌鲁木齐 830054

罗勒 (Ocimum basilicum L)，也被称为九层塔、金不换、圣约瑟夫草和甜罗勒，是一种矮小、幼嫩的唇形科(Lamiaceae)罗勒属 (Ocimum)香草植物。罗勒子(FRUIT OF SWEET BASIL)为罗勒的干燥成熟果实。据《本草纲目》记载，罗勒子俗称芒勒子、罗叻子，富含多种矿物元素、维生素、胡萝卜素、氨基酸等 ，具有明目、护肾、消除便秘、健身之功能［1］。罗勒子具有生干性寒、燥湿止泻、凉血止血、清热爽心等功能，主治湿热性或血液质性疾病，如湿热性痢疾、腹痛、腹泻、便血、痔疮出血及热性心脏疾病等［2］。现代研究表明，罗勒子具有利尿、抗氧化、防腐、消炎、抗癌、抑菌、治疗心血管疾病等作用［3－6］。目前，在相关报道中表示油类在种子中的含量高于植物的其他部位，罗勒属植物为主要芳香油植物之一［9］，前期研究结果表明罗勒子的挥发油进行了提取，并对其化学成分及其抗氧化活性和抗菌活性进行了分析［10－11］，且目前未发现对罗勒子的种子中的弱极性成分的研究鲜有报道。

本实验采用微波协助对罗勒子中的弱极性成分最佳提取工艺研究，并用气相色谱－质谱法 (GC－MS)对罗勒子挥发油进行分析，确定其主要成分含量，以期为进一步研究罗勒子挥发油的药理活性，以及充分利用罗勒植物这一植物资源在维吾尔药物研究中提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 研究对象 罗勒子，购于新疆和田，经中科院生态与地理研究所沈冠冕研究员鉴定为菊科罗勒属植物罗勒(Ocimum basilicum L.)的干燥成熟果实，标本存放于中科院新疆生态与地理研究所标本馆。

1.1.2 主要仪器 GCMS－QP2010气相色谱－质谱联用仪，购自日本岛津公司;BP211D型电子天平，购自德国Sartorius有限公司;RE－5298A旋转蒸发仪，购自上海亚荣生化仪器厂;SHB－ⅢS循环水式多用真空泵，购自郑州长城科工贸有限公司;XH－100A型微波提取仪，购自上海市翔皓仪器厂。

1.1.3 主要试剂 正己烷，氯仿 (西安化学试剂厂)，无水硫酸钠 (天津市红岩化学试剂厂)。

1.2 方法

1.2.1 材料准备 将罗勒子用蒸馏水洗净，放置在阴凉处晾干，粉碎，过20目筛后称取300.0g，分别称取10g，分为12组待用。

1.2.2 溶剂筛选 拟选用正己烷，氯仿，石油醚，乙酸乙酯四种溶剂进行溶剂筛选。所得图如图。

结论:最好提取溶剂是正己烷。

1.2.3 确定料液比及温度 前期经过实验得到该实验最佳的料液比为固体:液体=1:10，最佳温度为40℃

1.2.4 单因素试验 取事先称量好的罗勒子10g放入三口瓶中加入100ml正己烷放入微波提取仪中进行反应。时间调整为 2，4，6，8分钟;功率设为 200w，400w，600w，800w，提取结果如表1－及图2。

表1 提取时间和微波功率筛选 (g)

结论:最好提取条件为400w，6分钟。

1.2.5 样品甲酯化 取样品0.2g于玻璃试管中，加正己烷2ml溶解，加入0.2mol/L NAOH甲醇溶液，40°C水浴反应30分钟。取出冷却至室温加入饱和NaCl溶液静置10分钟，取上清液。

2 罗勒子弱极性成分分析

2.1 对罗勒子弱极性成分进行GC/MS分析 GC－MS条件如下:

仪器型号:Agilent7890A－5975C GC－MS。

色谱柱:HP－5MS毛细管柱 (30m×0.25mm×0.25μm)。

进样量:1μl。

升温程序:起始温度为60℃;以10℃/min的速率程序升温至180℃，保持2min;以2℃/min升温至260℃，保持10 min;以10℃/min的速率程序升温至280℃，保持2min。

电离方式:EI。

电离能量:70eV。离子源发生器温度:230℃。质量扫描范围:30～350amu。

2.2 GC－MS结果 经分析所得总离子流图如图3及表2所示。经计算机质谱数据库检索，鉴定出四种脂肪酸。主要为:棕榈酸 (6.850%);亚油酸 (18.677%);亚麻酸(69.734%);硬酯酸C18(4.738%)。

表2 GC－MS分析结果

3 讨论

3.1 实验前期对于提取所用试剂以及物料比进行了预实验，在实验过程中得到结论如下:通过使用氯仿，正己烷，石油醚，乙酸乙酯等四个溶剂后发现对于罗勒子中不饱和脂肪酸的提取最有效的是正己烷。

3.2 通过实验发现物料比对于提取率影响不大，在预实验中考虑到提取溶液的后因素，处理确定使用固液比以1:10的比例进行。

3.3 由图1以及图2可知对于微波提取罗勒子中的弱极性成分最主要因素是功率，在功率超过400w以后在600w以及800w提取率成直线趋势。其次对于提取率的影响条件为时间，在相同的功率条件下，通过单因素实验发现在6分钟以后提取率成下降趋势。综上所述得到最佳提取条件是在40℃，400w功率提取6分钟。通过实验发现，微波提取在对于植物内的有效成分的提取有着时间短，用料少，提取率高，提取方法简单等优点，适合进行实验提取，大大缩短时间时间，节省实验精力。

3.4 从以上研究结果可知:新疆罗勒子 (Ocimum basilicum L)弱极性成分提取率为25.8%，其中不饱和脂肪酸含量达到88.41%。通过GC－MS检测总共测出4个组分，根据Nist147谱库及Wiley7谱库进行检索共鉴定出4个化合物，鉴定出的化合物含量占总弱极性成分的97.54%。鉴定出的4个化合物当中主要成分为，亚麻油酸含量为69.734%，亚油酸含量为18.677%，棕榈酸含量为6.85%，硬酯酸含量为4.738%。其中生物体可将亚麻油酸转换成多元不饱和脂肪酸，这些脂肪酸有助减少包括血糖、脑血管堵塞、关节、消化系统、部份顽疾与脑力衰退等问题。而且亚麻油酸还可以抑制发炎细胞，防止管道堵塞，降低胆固醇和甘油三酸脂水平。［23］通过实验结果确定了微波提取对于种子中的不饱和脂肪酸的提取有着非常显著的效果，对于以后维吾尔特有药材中此类物质的提取工艺提供了切实可用的方法。

4 致谢

感谢中国科学院新疆理化技术研究所植物化学重点实验室提供的实验设备及条件。感谢理化技术研究所的领导及指导老师以及各位重点实验室老师的帮助与指导。

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