段宝奇，刘 忆，胡 静，高觉民

(江苏省中医院神经外科1、血液净化中心2，江苏 南京 210029)

难治性颞叶癫痫易引起早逝、外伤、精神病、认知障碍等严重后果[1]，多需要手术切除海马，虽然诸多学者对海马神经元改变致耐药难治等进行广泛研究，但关于海马星形胶质细胞在其中的作用研究较少。本文通过免疫组化、免疫印迹法(Western blot)、原位末端标记(TUNEL)方法检测P-gp、p53和细胞凋亡在星形胶质细胞的表达，探讨其在难治性颞叶癫痫患者中的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 17例难治性颞叶癫痫手术患者为2005年4月至2011年8月在我科手术的患者，其中男性7例，女性10例，年龄8～36岁，平均23.5岁，病程3～32年，平均10.5年。所有患者均正规服用抗癫痫药物治疗两年以上，仍不能控制发作，平均每个月发作>3次。术前患者均进行了长程视频脑电图检测棘波定位于颞叶；头部MR检查符合海马硬化诊断标准；癫痫血药浓度检测在有效浓度范围；均在皮层和深部电极监测下行前颞叶切除术。对照组为手术内减压治疗严重颅脑外伤3例和半球脑梗塞2例，均无癫痫发作史。所有患者均有患者或家属签署手术同意书。

1.2 标本 手术切除的每例脑组织标本均留取部分放入液氮保存备用，其余予4%多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，切成6 μm厚的切片，备行免疫组化和凋亡检测。

1.3 主要试剂 P-糖蛋白抗体购自Santa Cruz公司；p53抗体、β-action和二抗购自武汉博士德公司；原位末端标记检测细胞凋亡(TUNEL)试剂盒由Roche公司提供；即用型快速免疫组化MaxVision试剂盒，二氨基联苯胺(DAB)显色试剂等购自福州迈新生物公司。