梅建国，王玉茂，王文秀，唐世云，丁 壮，沈志强＊

（1.吉林大学畜牧兽医学院，吉林 长春 130062；2.山东省滨州畜牧兽医研究院，山东 滨州 256600）

高致病性猪繁殖与呼吸综合征（Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome，HP－PRRS），俗称高致病性猪蓝耳病，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）变异株引起的猪的高度接触性传染病，目前仍没有十分有效的药物和治疗方法。采用高质量的疫苗进行积极有效的预防接种，仍是控制该病最为重要的手段之一[1]。疫苗质量的优劣直接决定着免疫接种的成败，抗原制备作为疫苗制造的重要环节，无疑是决定疫苗质量的关键因素。目前，国内绝大多数动物疫苗的生产仍采用传统的转瓶生产工艺。这种工艺生产出来的疫苗表现出产品批间差异大、质量稳定性差、不良反应大、抗原滴度低、免疫效果差等缺陷，大大降低了我国动物疫苗产品的质量，已明显不能满足动物防疫的客观需要[2]。

本研究采用细胞生物反应器技术生产PRRSV抗原，并对培养过程中的各项技术条件进行优化，从而总结出一套较为合理的生产工艺，为HP－PRRSV的大规模培养提供可靠的参考数据。同时，将反应器工艺得出的试验结果与传统的转瓶工艺结果进行比较，显示了新型工艺的优越性。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞和毒种 Marc－145细胞系、HP－PRRSV致弱株，为山东省滨州畜牧兽医研究院生物技术重点实验室保存。

1.1.2 主要试剂与仪器 DMEM细胞培养基干粉为Invitrogen公司产品，优级新生牛血清为兰州民海生物工程有限公司产品，细胞培养级葡萄……