王启宇，兰邹然，姜 平，张 月，刘 娟

（1.南京农业大学动物医学院，江苏 南京 210095；2.山东省动物疫病预防与控制中心，山东 济南 250022；3.山东师范大学体育学院，山东 济南 250014）

猪瘟（Classical swine fever，CSF）是由猪瘟病毒引起的猪的一种急性或慢性、热性和高度接触性传染病[1]，临床主要以稽留高热、皮肤和黏膜出现大量出血点为特征。猪瘟病毒有C、Erns（E0）、E1和E2四种结构蛋白，其中E2蛋白是最主要的保护性抗原，能够刺激机体产生保护性抗体，并使机体抵抗致死量强毒的攻击；其基因总长度为1119bp，编码约370个氨基酸，始于猪瘟病毒多聚蛋白690位氨基酸残基，终止于1060位氨基酸残基，约为370个氨基酸，其N端上游有一段信号肽序列，C端有一段疏水性的跨膜区（TMR），并且E2蛋白具有两个相对独立的抗原结构单位，一个由B和C区组成，另一个由高度保守的A和D区组成，是产生中和抗体的主要区域[2]。猪瘟兔化弱毒疫苗株曾经有效地控制了猪瘟的发生和流行，但是近年来猪瘟免疫失败的现象很多，而且研究表明，许多地区猪瘟病毒流行毒株已向远离疫苗株的方向演变[3－6]，尽管猪瘟疫苗的有效性未被质疑，但是针对现阶段流行毒株研制相应的猪瘟疫苗作为技术储备已成为科技工作者的选择方向，其中亚单位疫苗以其特有的安全性倍受关注，并成为猪瘟新型疫苗研究的热点。

本研究构建了去跨膜区E2基因的毕赤酵母真核表达质粒，电转化整合到酵母X－33细胞基因组中，经过甲醇诱导表达，SDS－PAGE和 Western Blot鉴定，证明在酵母培养上清中，E2蛋白获得成功表达，为猪瘟亚单位疫苗和抗E2蛋白抗体诊断试剂的研究奠定了基础。……