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去氢甲睾酮ELISA 试剂盒的研制

2012-06-29姚萍,董英,王云,张勋

动物医学进展 2012年9期
关键词:标准检测

姚 萍,董 英,王 云,张 勋

(江苏大学食品与生物工程学院,江苏 镇江 212013)

去氢甲睾酮(1-dehydro-17a-methyltestosterone,DMT)是一种人工合成的蛋白同化类激素,又名大力补、美雄酮,化学名为17β-羟基-17α-甲基雄甾-1,4-二烯-3-酮。在临床上DMT可用于再生障碍性贫血、男性发育迟缓、烧伤处理等疾病的治疗[1-2]。DMT还具有促进动物体内营养物质沉积和改善生产性能的作用,在畜牧业上被用作动物饲料添加剂,以促进动物生长,提高产量[3-4]。但蛋白同化激素作为饲料添加剂应用于畜牧生产时,会在动物体内残留。当人们长期食用含有该药物残留的动物性食品时,会严重危害人类健康,如导致肝功能障碍,生殖功能紊乱,增加患心血管疾病的风险等[5]。因此,研制灵敏、高效、稳定的DMT残留检测方法非常重要。目前,激素的检测方法主要有GC-LC和LCMS[6],具有定量检测、准确可靠的优点,但是其检测成本高、样品预处理繁琐、费时耗力,不适于大量样品的筛检。免疫学检测方法具有灵敏准确,快速简便等特点,特别适合于小分子药物的现场快速检测[7-9],近年来得到了较为广泛的应用。

本研究以江苏大学食品营养与安全实验室自主研发的一株能稳定分泌去氢甲睾酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株为基础[10],应用 ELISA 原理[11]研制去氢甲睾酮残留快速检测试剂盒,并且对其各项指标进行了测定,为开发利用该试剂盒提供试验依据和技术基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物和杂交瘤细胞株 Balb/c小鼠由扬州大学实验动物中心提供;DMT-BSA完全抗原、稳定分泌去氢甲睾酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株1D6F10B4,江苏大学食品营养与安全实验室自制。……

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