于飞飞，陈福旺，宋 娜，杨 鑫，曹宇航，张 娟，傅震洲，王安峰，任林柱

（吉林大学畜牧兽医学院，吉林 长春 130062）

基因敲除是通过同源重组将外源基因整合入靶细胞基因组特定位置，以达到置换、修饰、改造靶基因，从而改变靶基因所控制的生物性状的目的[1]。随着分子生物学的发展，各种基因敲除动物相继问世。1987年Doetschman等建立了次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶基因定点敲除的小鼠模型[2]；1997年[3]英国科学家Willmut首次报道了克隆羊“多利”的诞生，开创了以体细胞为核供体的克隆动物先例，极大地推动了哺乳动物体细胞克隆技术的发展[4]；潘求真等[5]研究了山羊体细胞基因打靶克隆，为高表达转基因动物的制备提供了良好的手段与方法。近年来将基因敲除技术与核移植技术结合起来，制备和培育转基因动物取得了较大的进步。

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起的以流产、死胎、胎儿木乃伊化和呼吸道疾病为特征的传染病[6]。PRRSV属于动脉炎病毒科、动脉炎病毒属，基因组为单股正链RNA病毒，基因组全长约15kb[7]。根据病原基因组和血清型特性主要分为美洲型（代表株为VR2332）和欧洲型（代表株为LV），两者的核苷酸序列同源性约为60%，现阶段在我国流行的主要为美洲型毒株[8]。完全分化的原代猪肺泡巨噬细胞（porcine alveolar macrophage，PAM）是 PRRSV感染的靶细胞。研究发现，在PAM上存在PRRSV的3个受体，分别为硫酸乙酰肝素（heparin sulphate，HS）、唾液酸黏附素 （sialoadhesin，Sn）和CDl63（cluster of differentiation 163）分子[9－12]。

CD163又名M130，为具有丰富半胱氨酸的清道夫受体家族（scavenger receptor cysteine rich，SRCR）成员之一，是单链跨膜糖蛋白分子，也是一种巨噬细胞分化的抗原。……