刘联斌，薛 灵，周茂华，郭 萍，黄 刚，王小丽，吴 伟

(赣州市肿瘤医院 1、检验科 2、放疗科，江西 赣州 341000)

恶性肿瘤患者免疫功能是削弱的，T 淋巴细胞亚群是一项评价人体细胞免疫功能的重要指标，放疗可加剧由癌症诱发的低免疫功能，而细胞免疫功能与患者的预后密切相关[1-3]。放疗是鼻咽癌的主要治疗手段，放疗通过射线杀灭肿瘤细胞使患者得到康复，但又有可能抑制机体的免疫功能，造成不能完全被消灭的肿瘤细胞重新生长，导致肿瘤的复发和/或转移。本文通过流式细胞仪检测鼻咽癌患者放疗前后T 淋巴细胞亚群，以了解放疗对鼻咽癌患者免疫功能状况的影响。

1 材料与方法

1.1 临床资料 2010年6月至2011年12月来本院就诊的134例初治鼻咽癌患者，均经病理确诊为鼻咽低分化鳞癌，其中男98例，女36例。年龄24～67岁，中位年龄48岁。放疗前及放疗结束后即刻收集外周血标本，做T细胞亚群分析，外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+采用流式细胞术检测。

1.2 仪器和试剂 美国BD 公司FACSCalibur 流式细胞仪，用标准荧光微球校正光电倍增管(PMT)电压,建立荧光补偿,检查仪器灵敏度,使流式细胞仪处于最佳工作状态；美国BD 公司配套四色试剂MultiTESTTMIMK Kit，货号：340503。

1.3 样本制备与检测

1.3.1 所有样品按照要求采集外周静脉血2 ml,EDTA-K2抗凝,均在采样48 h 内完成检测。

1.3.2 在检测管中准确加入20μl MultiTEST 四色试剂和50μl全血,充分混匀后置室温阴暗处15min。加入450μl FACS 溶血剂(1x),充分混匀后室温阴暗处15 min。

1.3.3 标本制备后立即上机运行MultiTEST 程序检测。

1.3.4 每次检测均使用质控品同时检测,质控品的检测值均在其靶值±2s 范围内各样品检测值有效。……