N-乙酰-L-半胱氨酸对急性胰腺炎大鼠脑保护作用的实验研究
2012-06-20史敬东孙忆林宋茂民
湖南中医药大学学报 2012年10期
关键词:研究
史敬东,赵 晶,程 石,孙忆林,宋茂民
(首都医科大学附属北京天坛医院,北京 100050)
胰性脑病(PE)是一种继发于急性胰腺炎(AP)的神经系统并发症,其认知功能改变,死亡率高,但是发病机制尚未完全清楚。N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)是一种新型的抗氧化剂,有研究表明NAC是谷胱甘肽的前体,可抑制氧化张力诱导的细胞凋亡,提高神经细胞的存活率。本研究通过建立AP大鼠模型,观察通过注射NAC缓解AP时脑损害的发生和发展。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组
SPF级SD大鼠90只,雄性,购自北京维通利华实验动物有限公司。随机分成3组:正常对照组30只,AP组30只,AP +NAC注射组30只。
1.2 AP动物造模型以及给药方法
造大鼠AP模型[1],大鼠术前12 h禁食,不禁水。1%戊巴比妥钠(25 mg/kg)腹腔注射麻醉,正中切口入腹,于肝十二指肠韧带肝门侧用小动脉夹暂时夹闭胰胆管,由十二指肠前壁进针,进入胰胆管内,夹闭胆胰管出口,以0.1mL/min匀速逆行注入5%牛磺胆酸钠(0.1 mL/100 g)(购自Sigma公司),10 min后去除动脉夹,关腹。AP+NAC组造完模型后立刻给予动物由阴茎背静脉注射NAC(购自Sigma公司),剂量为200 mg/kg体质量。24 h后取标本。
1.3 脑组织含水量测定
采用常用的干重、湿重法测定:取出鼠脑的部分枕叶迅速用电子天平直接称湿重,然后放在80℃烤箱中36 h烤干,测鼠脑的干重。脑组织含水量=(湿重一干重)÷湿重×100%。3组各随机取10只。
1.4 脑组织TNF-α、MDA含量测定
取部分额叶脑组织按重量:冰生理盐水体积的比(w/v)=1∶4常规制备20%的匀浆,用ELISA法测定脑组织匀浆中TNF-α的含量(试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司),按试剂盒操作说明的方法进行;……
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