出血性大肠埃希菌O157∶H7广东分离株对小鼠致病性的研究
2012-06-19谢运冰郭霄峰
谢运冰,顿 灿,王 玉,郭霄峰
(华南农业大学 兽医学院,广东 广州510642)
肠出血性大肠埃希菌Escherichia coli O157∶H7(以下简称 O157∶H7)可引起人的出血性结肠炎(Hemorrhagic colitis,HC),引发溶血性尿毒综合征(Haemolytic uraemic syndrome,HUS)及血栓性血小板减少紫癜(Thrombotic thrombocytopenic purpura,TTP)等并发症.近年来,O157∶H7引发人的疾病在世界各地包括中国时有暴发流行,对人类健康和环境安全造成巨大威胁,引起各国的广泛关注.动物模型在研究肠出血性大肠埃希菌的毒力因子、发病机理及免疫保护反应方面具有重要作用,对于研究和筛选新疫苗以及评价免疫保护力更是必不可少的.目前报道的动物模型多采用小鼠,也有采用牛、猪或乳兔等,但由于多数实验动物对O157∶H7均不易感,效果大都不理想[1-4].笔者用萘啶酮酸对离乳小鼠进行处理,提高了小鼠对O157∶H7的易感性,使小鼠出现严重的临床症状甚至死亡并测定出半数致死量(LD50),为以后对O157∶H7毒力因子的进一步研究奠定了基础.
1 材料与方法
1.1 菌株
O157∶H7 021210(NalR)株[以下简称 021210(NalR)],由华南农业大学兽医学院微生物教研室谢运冰分离并保存.
1.2 试验动物
普通昆明鼠,20日龄,体质量10~12 g,性别随机.由广东省实验动物中心提供.
1.3 试剂
萘啶酮酸(Nalidixic acid)为Sigma公司产品.
1.4 菌液制备
将021210(NalR)株划线接种于LB固体培养基,挑单菌落,液体LB培养基37℃恒温振荡培养过夜,菌液4 000 r/min离心10 min,弃上清液,以1 mL 8.5 g/L的灭菌生理盐水重悬菌泥.菌液同时作倍比稀释,涂布LB固体培养基,进行菌落计数.
1.5 动物接种
将30只20日龄左右的小鼠随机分为6组,每组5只,腹腔注射前3 d饮水中添加萘啶酮酸(50 μg/mL),编号并称质量,记录所……
