肺抑宁I号对Lewis肺癌小鼠TNF-α表达的影响
2012-06-19张颖梁靓靓徐银娣蔡玉文
张颖 梁靓靓 徐银娣 蔡玉文
(辽宁中医药大学杏林学院,沈阳110100)
肺抑宁I号对Lewis肺癌小鼠TNF-α表达的影响
张颖 梁靓靓 徐银娣 蔡玉文
(辽宁中医药大学杏林学院,沈阳110100)
目的探讨肺抑宁I号对Lewis肺癌小鼠TNF-α表达的影响。方法以肺抑宁I号治疗Lewis肺癌小鼠,观察其对小鼠TNF-α表达的影响。结果肺抑宁I号能够上调细胞因子TNF-α蛋白的表达。结论肺抑宁I号上调细胞因子TNF-α蛋白的表达可能是其抗肿瘤的作用机制之一。
肺抑宁I号;Lewis肺癌小鼠;TNF-α
1 材料与方法
1.1 动物和瘤株10周龄雌性近交系C57BL/6小鼠60只,体重(20±2)g,清洁级,由中国医学科学院实验动物研究所提供,合格证号SCXK(京)2004-0001;Lewis肺癌细胞株,中国医科大学免疫教研室提供。
1.2 药物肺抑宁I号,组成:黄芪20g,人参20g,白术15g,南沙参15g,麦冬15g,山慈姑15g,莪术10g,天花粉15g,白花蛇舌草20g,土鳖虫10g,生甘草10g。购于千金堂药房。按中药常规煎法煎成相当生药1g/ml的药液,存4℃备用。注射用顺铂(DDP),10mg/支,齐鲁制药(海南)有限公司生产,国药准字H20073652,每日给药前用生理盐水配成1mg/ml溶液。
1.3 试剂和仪器一抗兔抗鼠TNF-α,碱性磷酸酶标记羊抗兔IgG,O-Dianidine,Tween-20,SDS,β-Naphthyl Acid Phosphate,NC membranes等。
1.4 实验方法
1.4.1Lewis肺癌小鼠模型的建立按常规方法将Lewis瘤株复苏,接种于C57BL/6小鼠腹腔,9d后抽取腹水以生理盐水洗涤,台盼蓝染色记录活细胞数>95%,调整细胞浓度至约2×106个/ml,选48只小鼠于右侧腋窝皮下接种0.2ml。
1.4.2 分组与给药接种5d后,选取荷瘤成功的小鼠40只,随机分为模型组(MG)、肺抑宁I号组(FG)、综合组(肺抑宁I号加顺铂组,FDG)、顺铂组(DG);取未种瘤的10只小鼠组成空白对照组(CG)。依据人和鼠给药剂量换算公式[2]dB=dARB/RA(WA/WB)1/3,各组均在接种5d后晨起空腹开始给药。……
