王 轶 吴 莹 王 洋 阎秀峰

(东北林业大学盐碱地生物资源环境研究中心/东北油田盐碱植被恢复与重建教育部重点实验室(东北林业大学)，哈尔滨，150040)

喜树(Camptotheca acuminataDecne)是我国特有的多年生亚热带落叶阔叶树种，属于珙桐科(Nyssaceae)喜树属，主要分布于长江流域及西南各省，因其次生代谢产物喜树碱具有良好的抗肿瘤活性而受到人们的广泛关注［1］。

一些丛枝菌根真菌能够侵染喜树的细根并与之共生形成丛枝菌根，有研究表明:喜树幼苗中喜树碱含量的变化与菌根真菌侵染及菌根形成过程具有相关性［2］。为了深入探讨喜树碱与共生关系及过程的相关机理，需要对喜树幼苗不同级别细根中的喜树碱进行精细分析，测定微小根段中的喜树碱含量。然而，目前常用的基于紫外检测器的高效液相色谱方法测定喜树碱含量［3－5］，实验操作中样品质量通常为1～2 g喜树干样，所需样品量大且灵敏度不高，无法满足上述研究工作需求。

借助于喜树碱具有自发荧光的特性，作者建立了基于荧光检测器的喜树碱含量高效液相色谱测定方法，样品量可以降低至2 mg(干质量)，可以满足微量植物材料中喜树碱含量的精确测定。

1 材料与方法

仪器:高效液相色谱系统，包括515型单泵、717型自动进样器、2475型荧光检测器(美国Waters公司);Sorvall Legend Micro17型离心机(美国Thermo公司);H—H—2数显恒温水浴锅(江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司);Sartorius BT25S电子分析天平(精度0.01 mg);Bransonic—321超声波清洗机。

实验材料:选取成熟饱满的喜树种子(来源于四川省金堂县)，用0.5%的 KMnO4浸泡消毒0.5 h，无菌水洗净后，播入经过121℃灭菌2 h的细沙中催芽。……