金 华 尚敏克 姜国斌

(大连民族学院，大连，116600)

杨树是世界上分布最广、适应性最强的树种，也是优良的水土保持植物［1］。通过基因工程技术对杨树进行抗逆性的遗传改良受到世界各国学者和研究人员的普遍关注［2－3］。近年来，在杨树基因工程研究中所涉及的外源基因主要包括用以清除活性氧的GSH基因［4］、液泡Na+/H+逆向转运蛋白基因At-NHX1［5］及甘露醇合成基因mtl－D［6］等，部分研究结果已证实，转基因植株增强了对干旱、低温或盐渍等逆境胁迫耐性。当然，在杨树的遗传转化中，转化成功与杨树的基因型、外植体以及转化条件等有很大关系［7－10］。

NDPK2基因主要编码植物核苷二磷酸激酶2(NDPK2)。近年来的研究表明，NDPK2与促分裂原蛋白激酶(MAPK)级联反应，结合 MAPK3和MAPK6［11］，进而上调 POD、CAT、硫氧还蛋白、硫氧还蛋白还原酶和过氧化物还原酶等多种抗氧化酶基因的表达，调节细胞的氧化还原状态［12］。拟南芥核苷二磷酸激酶2基因(AtNDPK2)对大麦［13］、马铃薯［14］的遗传转化研究也表明，AtNDPK2基因的过量表达增强了作物对干旱或极端温度的忍耐性。At-NDPK2基因对作物的遗传转化具有重要的实践意义。但迄今为止，未见有关此基因在杨树中转化的报道。

转双抗虫基因741杨是河北农业大学林学院生物技术实验室和中国科学院合作，运用农杆菌介导法将Bt杀虫蛋白基因(BtCry1Ac)和慈菇蛋白酶抑制基因(AHPI)，即双价抗虫基因同时转入优良毛白杨无性系741杨获得的转双抗虫基因无性系［15］。本试验旨在以转抗虫基因741杨为试验材料，通过对转化条件的优化，建立稳定的遗传转化体系，并采用农杆菌介导的转化方法，胁迫诱导型启动子SWPA2调控的AtNDPK2基因导入转双抗虫基因741杨，以期获得既抗虫且抗非生物胁迫能力强的转基因杨树新品系。……