王凤羽 马林先 李聪敏 常明秀 丰慧根 张金枝 孟 丽 王玉伟 刘治佑

1.河南省人口和计划生育科学技术研究院，河南省出生缺陷干预技术研究重点实验室(郑州，450002);2.新乡医学院生命科学技术系;3.河南省胸科医院

先天性心脏病(CHD)是胚胎在发育过程中由于心脏、血管发育障碍所致的心脏血管形态、结构、功能、代谢上的异常［1］。22q11.2微缺失综合征是迄今为止少数已明确的CHD病因之一。22q11微缺失区域位于 D22S427/1638和 D22S306/308之间，大小为1.5～3 Mb。目前普遍认为，缺失发生的原因是染色体减数分裂后重组时出现不对称和异常。Saita等［2］对20个DGS/VCFS家系22q11.2区域的3Mb片断进行了研究，结果发现单倍体重组时同源染色体近端内部交换现象极为普遍。此外，22q11区域的低重复拷贝序列(LCRs)间错误结合也可导致一对染色体重排，其中一条发生缺失。本研究运用多重链接依赖式探针扩增技术(MLPA)对CHD患儿进行22q11微缺失检测，了解其在CHD患儿中的发生情况，探讨 MLPA用于临床诊断22q11微缺失的应用价值，为CHD的优生咨询和产前诊断提供依据。

1 对象与方法

1.1 研究对象

随机选取2010年6月～2011年5月河南省胸科医院小儿心胸外科CHD患儿120例为研究对象。其中男性58例，女性62例;年龄6个月～12岁;相互之间均无亲缘关系。所有病例均经临床、心脏彩超、手术确诊，且采用细胞培养的方法进行染色体核型分析，未发现异常。本研究标本使用均得到患儿家属知情并同意。60例无CHD家族史的河南汉族正常儿童作为正常对照。

1.2 方法

1.2.1 基因组DNA提取与检测 用醋酸钾沉淀蛋白质，异丙醇沉淀基因组DNA，TE溶解。……