刘冰 王利军 牛凯 史亚男

在肾脏病患者中，转化生长因子-β1(transforming growth factor β1，TGF-β1)可调节炎性反应，促进细胞外基质(ECM)的合成和沉积，减少ECM的降解，肾间质纤维化主要是由于细胞外基质产生与降解失衡以及成纤维细胞过度增生所致［1］。伊贝沙坦对胰岛素抵抗肾组织中TGF-β1表达的影响与肾间质纤维的关系和机制尚不清楚。为此进行了相关研究。

1 材料与方法

1.1 实验动物的来源与分组 8周龄雄性SD大鼠32只，由河北医科大学实验动物中心提供。将大鼠随机分为对照组，模型组，伊贝沙坦50mg/kg、100mg/kg干预组，每组8只。模型组以高脂高糖饲料喂养，对照组一直予以基础饲料喂养直至实验结束。干预组中伊贝沙坦(法国Sanofi公司提供)溶于蒸馏水按大鼠体重灌胃，饲料喂养与模型组相同。喂养12周后处死动物，观察结果。

1.2 收缩压(SBP)的测定 在每周日早晨8∶00～10∶00将大鼠在箱中预热38℃，10min后，用尾袖法测量大鼠尾动脉血压。

1.3 空腹血糖(FBG)、胰岛素(FINS)测定 喂养12周后，大鼠禁食12 h过夜，血糖仪检测空腹血糖(FBG);酶联免疫法测定血清胰岛素(FINS);计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)，公式为(Ins×FBG)/22.5，统计时取自然对数使其符合正态性，再进行统计。

1.4 组织病理学检查 SD大鼠处死后立即取肾脏组织液氮冷冻，－70℃保存。用Trizol RNA提取试剂盒提取总RNA，RTPCR按照逆转录试剂盒说明书进行。TGF-β1 PCR反应条件:95℃预变性 5min，94℃变性30 s，54℃退火30 s，72℃延伸45 s，32个循环，最后72℃保温10min。GAPDHPCR反应条件:95℃预变性 5min，94℃变性 30 s，51℃退火 30 s，72℃延伸 45 s，30个循环。产物经112%琼脂糖电泳和凝胶成像系统分析，计算与内参照β-actin吸光度A比值。取10 μl的RT-PCR产物，加入2 μl的DNA上样缓冲液，混匀后加样。……