罗晓东，沈二霞，陈代雄，丁 雪，李 华

广州管圆线虫作为一种新发传染病的病原，主要侵犯中枢神经系统，引起嗜酸性粒细胞增多性脑膜脑炎或脑膜炎。近年来在我国浙江、辽宁、福建、云南和北京等地先后出现广州管圆线虫病的暴发流行［1－2］，其重要性已越来越引起医学界的重视。而宿主感染后产生的针对广州管圆线虫的免疫应答的研究，对于我们了解宿主抗损害作用的特点、虫体的致病机制和免疫学诊断等有重要意义。脾脏是哺乳动物最大的外周免疫器官和血源性抗原最主要的免疫应答场所，也是包括淋巴细胞在内许多免疫细胞定居区域。而感染后脾脏淋巴细胞学的改变能较好地反映宿主对寄生虫免疫应答的特点。因此，本研究以小鼠为动物模型，采用流式细胞术和酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法对其感染广州管圆线虫后脾脏T淋巴细胞亚群及其细胞因子分泌水平的变化进行了观察。

1 材 料

1.1 实验动物 雌性4～6周龄的BALB/c小鼠，SPF级，购自广东省医学实验动物中心。

1.2 主要试剂和仪器 RPMI1640培养基、Hank’s液购自英维捷基公司；胎牛血清购自杭州四季清公司；Saponin、离子霉素及Brefeldin A（BFA）均购自Sigma公司；PerCP抗小鼠CD4单克隆抗体、FITC抗小鼠CD8a单克隆抗体、APC抗小鼠IL-4、APC抗小鼠IFN－γ、PE抗小鼠IL-17均购自BD公司；PMA 购自杭州联科公司；IL-4（DY404）、IL-17（DY421）ELISA检测试剂盒购自R＆D公司。流式检测采用BD公司Calibur流式细胞仪。ELx800型酶标仪由BioTek仪器公司生产。1267P型CO2培养箱由上海易亮医疗器械有限公司生产。

2 方 法

2.1 感染动物模型的建立 褐云玛瑙螺由本实验室饲养和人工感染。……