彭 生 汪 伟 李 炜 董 楠

1.江苏省无锡市第四人民医院麻醉科，江苏无锡 214062；2.江苏省血吸虫病防治研究所，江苏无锡 214064

中性粒细胞（PMN）是介导炎症反应的重要效应细胞。PMN激活后可以释放大量炎性细胞因子，炎性细胞因子又可延迟PMN凋亡，造成更多炎性细胞因子的释放。而过量的炎性细胞因子是ARDS及MODS发病的重要因素。因此阻断PMN的激活及其下游细胞因子的转录具有重要意义。丙泊酚是常用的静脉全麻药，在体动物研究显示其可以抑制PMN激活，减少炎性细胞因子的释放[1]。而对于人体PMN的作用研究报道较少。本文拟离体研究丙泊酚对激活状态下人体PMN释放细胞因子的变化，并初步探讨其机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

丙泊酚（阿斯利康公司赠予）；内毒素（E．ColiO55：B5，sigma公司，美国）；中性粒细胞分离液，淋巴细胞分离液（天津灏洋生物公司）；p65 antibody（Santa Cruz Inc.，美国）；TNF-a、IL-8 检测试剂盒（CST，Inc.，美国）。

1.2 PMN分离

20例健康志愿者，均经知情同意，确认没有血液病、免疫性疾病、慢性炎症、发热等情况，近期无手术、麻醉史，未服用过抗炎药物、免疫调节药物，无长期使用镇静药物的病史。年龄 21～28 岁，平均（24±3）岁，男女比例为 8/12，每人采取外周静脉血20 mL，加入20 U/mL肝素抗凝。1 200r/min，离心10 min，弃血浆层；加入淋巴细胞分离液后离心（2 000 r/min，20 min），弃单核细胞层、分离液层；剩余白细胞层和红细胞层中加入9 倍体积 0℃的 NH4Cl液（Cl：155 mmol/L，KHCO3：10 mmol/L，EDTA：0.1 mmol/L）充分均匀后0℃下静置7 min，再次离心（1 500 r/min，10 min），然后用 0.9%的生理盐水洗涤 2次，以RPMI 1640培养液悬浮细胞，使细胞浓度为1×107/mL。瑞氏染色证实其纯度＞95%，苔盼蓝排斥试验检测，活细胞＞98%。分组每例分离好的PMN分……