刘 冰，牛 芸，张德著，张汉波，杨明挚**

（云南大学生命科学学院，昆明 650091）

蜜环菌以菌索的形式侵入天麻营养繁殖茎并被同化，是天麻无性繁殖阶段的唯一营养源[1]。在生产流程上，天麻种植用蜜环菌菌种分为三级：母种 （一级）、原种 （二级）和栽培种 （三级）。从天然环境中分离纯化得到的母种经扩大培养成为生长旺盛的原种，再接种于固体培养料形成用于转染菌材的栽培种。一级、二级菌种的质量好坏影响到三级菌料及菌材上菌索健壮程度及多寡，而后者则直接决定了天麻的质量和产量[2]。目前常用固体PDA加富培养基培养母种，蜜环菌虽能在其基质中生长但存在菌丝易于老化、菌索细弱长势差等缺点[3]。原种则多采用木屑培养基或液体PDA加富培养基[1-2]。然而目前液体培养方法主要集中于工业发酵领域，研究所得的培养基和培养条件不适合在天麻种植户中推广。本试验拟在现有研究成果上针对母种及原种培养基进行优化，以期筛选出菌丝体性状优良且高产的固体母种配方和适应农业生产实际的液体原种配方。

1 材料与方法

1.1 材料

直径1cm及以下板栗细小枝条 （Castarea mollissima）和玉米芯采自昆明市郊。马铃薯购自市场，其余试剂类均为国产分析纯。普通型及加富型PDA培养基 （固体型及液体型）配方参考徐锦堂[1]、兰进[2]等。自昭通彝良小草坝采集的腐烂木材韧皮部中分离得到的蜜环菌 (Armillaria mellea)菌株，利用ITS序列进行分子鉴定后，保存于普通PDA培养基上备用。

1.2 方法

1.2.1 母种培养