香菇多糖增强5－FU抑制结肠癌细胞增殖机制研究

2012-05-30袁昌劲孔庆志卢宏达孔双喜

中国实验诊断学 2012年6期

袁昌劲，孔庆志，卢宏达，孔双喜

（1.武汉市中心医院肿瘤科，湖北武汉430014；2.华中科技大学附属同济医院肿瘤科）

香菇多糖主要为甘露糖甘肽，其余为多种糖分和各种氨基酸等，对光和热稳定，不溶于甲醇、乙醇和丙酮等有机溶剂［1］，联合抗肿瘤药物对胃癌［2］、结肠癌［3］、肺癌［4］等肿瘤具有良好的疗效，显著延长肿瘤患者存活时间。目前对香菇多糖的抗肿瘤机制仍然不清楚，一般认为和免疫调节有关。香菇多糖是典型的T细胞激活剂，体内外均能促进细胞毒T淋巴细胞（CTL）的产生，提高CTL细胞杀伤力，增强正常或免疫功能低下小鼠的迟发型超敏反应，提高抗体依赖性细胞毒作用，同时能结合到人单核细胞上激活内源性信号传导通路［5，6］。本文应用香菇多糖及5－FU处理SW480结肠癌细胞，探讨其对细胞增殖和凋亡的影响，并研究其可能作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

SW480结肠癌细胞购于美国ATCC，RPMI－1640、双抗和FBS购于Gibco公司，MTT试剂购于Sigma公司，RNA 提取和 RT－PCR试剂盒购于Takara公司，引物由上海生工公司合成，香菇多糖采用南京康海药业有限公司的香菇多糖冻干粉剂，5－FU购于Sigma公司。

1.2 细胞培养和药物处理

SW480结肠癌细胞完全培养基为10%FBS、89%RPMI－1640和1%双抗，培养条件为37℃、5%CO2恒温培养箱，实验时取对数生长期细胞。香菇多糖冻干粉剂用生理盐水配制成5μmol／ml，5－FU用生理盐水配制成500mg／L存储液，根据王峻［7］和Harada［8］等研究，使用时加入完全培养基配制如下浓度工作液①Len组：Lentinan终浓度0.05 μmol／ml；②FU组：5－FU终浓度100mg／L；③L＋F组：Lentinan终浓度0.05μmol／ml和100mg／L 5－FU终浓度。