张文宣，赵 南，张金儿，朱江萍，刘义雄

(江西新瑞丰生化有限公司，江西 新干 331307)

赤霉素(俗称920)属于植物五大激素之一，是一种高效植物生长调节剂，能迅速地刺激植物的生长发育，促进植物提早开花结实，有效地打破植物种子、块茎的休眠期，促进萌发，诱导单性结实，减少棉花花蕾脱落等，在农、林、园艺等方面具有广泛的用途。随着赤霉素在啤酒生产、蔬菜水果、农林畜牧等应用领域的进一步拓展，其市场前景将更广阔。

赤霉素在我国已有近40年的生产历史，早期有较多生产水平低的专利和基础研究文献报道[1]，偶见一些综述性文献[2]，实际应用研究报道却很少，20世纪70年代成功地筛选到4303高产菌株[3]，促进了赤霉素生产的发展。随着微生物细胞工程的研究与发展，原生质体的形成、再生、融合与定向筛选技术越来越多地应用在微生物的育种过程中。李武军等[4]建立了藤仓赤霉菌原生质体形成与再生技术；刘冬华等[5]进行了原生质体的紫外线诱变育种研究。

作者在借鉴上述研究的基础上，对赤霉素原生质体的制备纯化工艺进行改进，并利用定向筛选机理，建立了赤霉素产生菌的诱变筛选模型，应用于抗药性突变高产菌株的筛选工作，取得了良好效果。

1 实验

1.1 菌株、试剂和培养基

出发菌株：藤仓赤霉菌4303-N菌株。

高渗溶液：0.7 mol·L-1NaCl溶液。

纤维素酶、蜗牛酶、果胶酶均为上海产，其余试剂均为CP或AR级。

斜面培养基(MM)：葡萄糖、硝酸钾、琼脂等。

菌丝生长培养基(MGM)：葡萄糖、甘氨酸、琼脂等。……