苏松坤， 晏励民， 刘 芳

（浙江大学 动物科学学院，浙江 杭州 310058）

乳酸菌包括大量革兰氏阳性球菌和杆菌，在发酵食品的生产和保存中广泛应用。由于乳酸菌是安全级食品，所以大量的菌在基因水平上都进行了修饰，并且通过克隆技术介入特定的基因来改善乳酸菌本身的性状，但是，传统乳酸菌表达外源蛋白的效率仍然比较低。同时，目前报道的乳酸菌表达载体系统所使用的选择标记均是抗生素抗性基因，而抗药性基因将不断向环境中漂移扩散，这对生物安全性造成了严重危害[1]。鉴于传统乳酸菌基因表达系统的上述弊端，国内外学者一直致力于获取高效且对人和动物无毒副作用的表达系统，也就是所谓的食品级表达系统。早在1987年，Willem就提出了乳酸菌的选择标记必须采用食品级这一观点[2]，之后，乳酸菌食品级表达系统作为高效而安全的表达系统得到了广泛的应用。作者就乳酸菌食品级表达系统在食品、医学、保健品上的应用的最新进展进行了综述。

1 乳酸菌食品级基因表达系统必须具备的基本条件

1.1 表达载体必须是食品级

乳酸菌食品级表达系统所使用的载体必须是食品级的，不能含有非食品级功能性DNA片段。长久以来，人们构建了大量具有抗生素抗性标记的载体用于乳酸菌基因水平上的修饰。但由于抗生素抗性基因存在安全隐患，许多用于乳酸菌的食品级选择标记已经发展起来，这些选择标记是基于生物的天然性质，如糖发酵、氨基酸代谢、核苷酸生物合成和细菌的免疫抗性[3]。……