胰岛素对心肌缺血/再灌注损伤兔心肌组织中髓过氧化物酶活性的影响及意义
2012-04-13王国坤倪飞华冯金忠邱一华张海峰秦永文
吴 峰,王国坤,倪飞华,冯金忠,邱一华,李 嘉,张海峰,高 峰,秦永文
(1第二军医大学附属长海医院,上海200433;2第四军医大学; 3解放军第九八医院)
心肌梗死与炎症反应密切相关,缺血/再灌注(MI/R)后心肌组织可出现较前损伤加重的情况,目前研究认为可能是循环血中的中性粒细胞(PMN)向血管内皮黏附,并最终迁移和聚集在缺血的心肌组织中,活化的PMN可释放大量的毒性物质,如H2O2、超氧阴离子及酶类物质等,从而加剧了心肌缺血再灌注(MI/R)[1,2]。胰岛素在临床危重症患者中应用后能够明显降低其败血症和脓毒血症的发生率[3],研究[4]提示,胰岛素可能存在重要的抗炎作用。结合我们2008年以来的研究工作[5],近期我们又观察了胰岛素是否能够通过抑制PMN在心肌组织中聚集而减轻局部及全身炎症反应,达到保护MI/R心肌的作用。髓过氧化物酶(MPO)活性是反应PMN聚集、浸润程度的重要指标,本研究通过检测心肌组织中的MPO活性反应PMN在局部心肌组织的浸润情况。
1 材料与方法
1.1 实验动物及材料 健康新西兰大白兔(40只,由第二军医大学实验动物中心提供),雄性,体质量2.5~3.0 kg。胰岛素为诺和诺德公司产品;肌酸激酶同工酶(CK-MB)、MPO、高敏C反应蛋白(hs-CRP)活性检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所;伊文氏蓝和氯化三苯基四氮唑(TTC)购自Sigma公司。
1.2 模型制备和实验方案 用3%戊巴比妥钠行兔耳缘静脉注射麻醉(1 mL/kg),心电图监测。切开实验兔皮肤,沿胸骨左缘开胸,剪开心包,暴露心脏,以无创针带单丝线在冠状动脉(冠脉)左旋支(LCX)中部穿过,线两端共套一聚乙烯管,形成闭合环,拉紧丝线,钳夹聚乙烯管即阻断LCX前向血流,心脏表面可见青紫,心电图出现ST段上升,松开闭环后心肌获得再灌注,青紫可减轻。……
