叶敬礼 （江苏省宿迁市宿豫区农业委员会 223800）



传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定

叶敬礼 （江苏省宿迁市宿豫区农业委员会 223800）

猪高热综合征是近年来由多种病原混合感染和继发感染引起的一种以发热、皮肤发红、出现呼吸道和繁殖障碍等为主要特征的综合征。其中胸膜肺炎放线杆菌(APP)是引起呼吸道症状并加大治疗难度的重要病原之一。APP引起的猪传染性胸膜肺炎，是一种高度接触传染性呼吸道疾病，给世界各地的养猪业造成了巨大的经济损失。本试验对猪高热综合征中胸膜肺炎放线杆菌的感染进行了初步研究，分离鉴定了10株胸膜肺炎放线杆菌，为高热综合征的控制和治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 病料 2010年9月至2012年5月，从宿豫区发生高热综合征的56个猪场共采集猪病料142份，其中肺50份、关节液30份、心血40份、脑8份、脾脏6份、淋巴结5份和浓汁3份。

1.2 主要试剂及仪器 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD),购自中国医药(集团)上海化学试剂公司。犊牛血清自制。胰蛋白大豆琼脂(TSA)购自Difco公司。微量生化签定试剂购自杭州天和微生物试剂有限公司。TaqDNA聚合酶、dNTPs、DL2000 DNA Marker均购自宝生物（大连）有限公司。凝胶成像系统、电泳仪均为Bio-Rad公司产品。PCR扩增仪为Touchgene公司产品。

1.3 分离鉴定 （1）将病料接种于含NDA和血清的TSA固体培养基，置于5%CO2，37℃培养24~48h；挑取圆形、光滑湿润、无色透明、直径1~2mm的可以菌落，进行纯培养。（2）将可以菌落的纯培养物分别接种不含NAD和血清的TSA、不含NAD単含血清的TSA的平板，观察菌落生长情况和形态大小。……