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MicroRNA研究方法进展

2012-11-22王平山东省泰安市岱岳区畜牧兽医局271000

山东畜牧兽医 2012年12期
关键词:检测方法研究

王平 (山东省泰安市岱岳区畜牧兽医局 271000)



MicroRNA研究方法进展

王平 (山东省泰安市岱岳区畜牧兽医局 271000)

miRNAs是一类内源性、约22个核苷酸长度的非编码RNA,具有稳定的特异性序列以调节基因表达。2001年,miRNAs作为线虫生长发育过程中的调节器而被发现,在病毒、植物和动物体中,miRNAs已被公认为主要的调控基因家族之一,通过mRNA靶向作用降解或抑制其翻译。

小RNA在生物进化过程中高度保守,并已被证实参与和调控包括时序发育、细胞凋亡脂肪代谢、神经元发育、细胞分化、激素分泌等在内的多种生理过程,以及包括肺癌、白血病在内的多种疾病发生过程[1]。目前,对小RNA表达的鉴定主要依靠以杂交、PCR、生物芯片的方法;对靶标的确定,主要依靠生物信息学方法;对其功能线索的获得,则主要依赖于在特定细胞或动物模型内外源性抑制或表达相应的小RNA基因,再通过报告基因系统验证后检测特定细胞或动物模型发育过程中的生化或分子变化来实现,并同时利用报告基因系统对小RNA的靶基因进行验证。在此笔者对经典的及最新发展的研究小RNA的技术方法作简要的总结和概述。

1 miRNA基因鉴定

1.1 遗传学方法

正向遗传学的原理是把突变的基因从产生非正常表型的生物体或者组织当中分离出来,进行研究鉴定。而反向遗传学则在体外引入特定的突变,然后把已突变的基因放回到原来的宿主当中,而且常常是通过同型基因化或换位放回到宿主中原来的位置上,从而观察表型的改变。……

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