浅谈应用生物反应器发酵估算细胞量

赵立民 罗乃杰 蒋天华（广东温氏食品集团有限公司研究院 广东 新兴 527400）

生物反应器作为一种高效能的生产方式，现在越来越受到国内兽苗企业的重视。其在生产中表现出的高效率、高产能、高质量，相比传统的转瓶生产工艺是一次质的飞跃。但另一方面，生物反应器作为高技术设备的体现，其对工艺技术水平和操作人员的要求也大幅度提高。本人根据多年生物反应器使用经验，谈一谈在细胞培养后期阶段如何判断细胞密度是否达到峰值。

1 应用生物反应器的意义

在生产中，当细胞达到最大生长密度后，就可以接种病毒。该时机选择的恰当与否，直接关系到病毒抗原的产量与质量，是极为重要的操作步骤之一。对于使用片状载体或固定化床技术等类型的反应器，由于无法直接取样观测到细胞的生长状态，需要通过分析反应器发酵的其他参数进行估算。

2 细胞密度峰值的判定方法

2.1 单个细胞耗糖法 当反应器中的细胞发酵几天后，记取细胞消耗葡萄糖量。然后结束发酵，消化反应器中的细胞并计数，计算出细胞总量。用细胞耗糖量除以细胞总量得到单细胞耗糖量。在反应器发酵过程中，可以用细胞耗糖量除以单细胞耗糖量，得到细胞总量。

2.2 细胞耗糖稳定法 反应器发酵后，随着细胞的增殖，耗糖会逐步增加。当细胞量达到最大后，数目不再增多，耗糖量将维持在一个较为稳定的范围内。……