利用合适的启动子提高外源基因在Jurkat细胞中的表达
2012-04-13袁娟牟宗春游佳马维骏
袁娟,牟宗春,游佳,马维骏
·论著·
利用合适的启动子提高外源基因在Jurkat细胞中的表达
袁娟,牟宗春,游佳,马维骏
目的通过选择合适的启动子来实现外源基因在 Jurkat 细胞中的高效表达。
Jurkat 细胞; 启动区(遗传学); 基因,报告; 萤光素酶类
www.cmbp.net.cn 中国医药生物技术, 2012, 7(4):281-285
Jurkat 细胞是一种分离自白血病患者外周血T 淋巴细胞的细胞系[1],通常用于细胞因子受体表达、T 淋巴细胞信号通路、T 淋巴细胞激活、癌症对药物和放射耐受差异的机制、急性 T 淋巴细胞白血病发病机制以及治疗方法等方面的研究[2-3]。该细胞在植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)或者刀豆蛋白 A(concanavalin A,ConA)刺激下能够产生大量的 IL-2,且其产生的 IL-2 能够促进已被抗原激活的效应 T 淋巴细胞的增殖[2]。因此,Jurkat 细胞是一种研究哺乳动物 T 淋巴细胞以及免疫相关功能的良好工具。哺乳动物细胞中这些功能的研究,常常需要有效的启动子过表达相关基因。启动子是基因表达的“开关”之一,其对基因的表达起着重要的调控作用。在真核生物中,不同的转录因子可以与相应的启动子序列结合,从而精确地调控基因表达的时间和水平[4]。因此,选择具有高表达活性的启动子对驱动基因高效表达是非常关键的。在大多数哺乳动物细胞中,一般选择表达活性较强的病毒启动子[5-7],如猿猴病毒 40 (simian virus 40,SV40)早期启动子、巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)即刻早期启动子。但是在有些哺乳动物细胞中,例如 Jurkat 细胞系中,SV40 和 CMV 启动子的活性并不高[8-9]。而一些细胞启动子,如人源的延长因子 1α(elongation factor-1,EF1α)启动子、人源的泛素 C(ubiquitin C,UbC)启动子也是能高效表达外源基因的启动子[10-11]。……
