倪志强 方艳秋 谭岩

近年来，肿瘤的发生率明显增高，严重影响人们的生命安全和生活质量。虽然肿瘤的治疗方法不断提高，但其病死率仍然居高不下。非小细胞肺癌化疗敏感性较小细胞肺癌差，且发现时多为晚期，患者的预后较差，故寻找有效的靶向治疗具有重要的临床意义。Pim家族是一组参与钙调节的相关蛋白激酶，Pim蛋白具有抗凋亡的作用，Pim-3作为Pim家族的新成员，已有基础研究证实其与肺癌A549细胞的凋亡明显相关[1]，但Pim-3与临床非小细胞肺癌的相关性未见报道，故笔者对Pim-3在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义进行探讨，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2010年1月～2012年5月的非小细胞肺癌标本40例（男26例，女性14例），年龄37～78岁，平均65岁。所有患者手术前均未接受放疗、化疗、生物治疗或其他抗肿瘤治疗；其中腺癌17例，鳞癌23例；分化程度：I级11例，II级9例，III级10例，IV级10例；有淋巴结转移者25例，无淋巴结转移者15例。选择我院同期因肺脓肿或肺外伤手术患者40例的正常肺组织作为正常对照组。

1.2 免疫组化法检测肺组织Pim-3蛋白的阳性表达 石蜡切片脱蜡至水；3%H2O2室温孵育5～10min，以消除内源性过氧化物酶的活性；蒸馏水冲洗，PBS浸泡5min×2次；5%～10%正常山羊血清（PBS稀释）封闭，室温孵育10min，倾去血清，勿洗；滴加一抗工作液，37℃孵育1～2h或4℃过夜；PBS冲洗，5min×3次；滴加适量生物素标记二抗工作液，37℃孵育10～30min；PBS冲洗，5min×3次；滴加适量的辣根酶或碱性磷酸酶标记的链霉卵白素工作液，37℃孵育10～30min；PBS冲洗，5min×3次；显色剂显色3～15min（DAB）；自来水充分冲洗、复染、脱水、透明、封片。……